大鼠脂肪间充质干细胞体外分离培养及CM-DiI标记后的传代示踪

发布时间：2017-12-29 16:23

  本文关键词：大鼠脂肪间充质干细胞体外分离培养及CM-DiI标记后的传代示踪　出处：《安徽医科大学学报》2016年11期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的建立大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)体外分离培养和细胞标记的方法,探讨CM-Di I标记ADSCs在体外传代示踪的可行性。方法无菌切取SD大鼠腹股沟脂肪组织,运用酶原消化并差速贴壁的方法获取原代细胞并进行传代培养。观察细胞形态,对第3代ADSCs进行细胞表型鉴定和成骨成脂分化能力鉴定。采用CM-Di I标记第3代ADSCs并进行传代培养,荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察荧光标记情况,流式细胞仪检测标记率。结果 ADSCs呈长梭形、漩涡样生长,传代后细胞生长增殖速度加快。流式细胞仪检测结果显示CD29、CD90阳性表达,CD34、CD45、CD31阴性表达。茜素红和油红O染色显示ADSCs具有成骨成脂分化潜能。CM-Di I标记的红色荧光存在于细胞膜和细胞质,不存在于细胞核,传代培养后荧光有所衰减,第3、6、9代的荧光标记率分别为97.09%、66.21%和37.86%。结论大鼠ADSCs的生长增殖能力强,具有多向分化潜能,采用CM-Di I标记ADSCs简单易行且示踪效果良好,可为后期体内实验提供依据。
[Abstract]:......
【作者单位】： 西南医科大学附属医院整形烧伤科;西南医科大学附属医院骨关节外科;
【基金】：国家自然科学基金(编号:31271049) 四川省卫生厅科研课题(编号:090228) 泸州市科学技术局指导性科技计划项目(编号:2010-6)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 2016-06-27接收脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)在2001年首先由Zuk et al[1]从人脂肪组织中发现,其类似于骨髓间充质干细胞,能够稳定增殖及自我更新,具有多向分化潜能。与其他干细胞相比,ADSCs具有来源广泛、取材容易且获取率高、体外扩增快、细胞老化率

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