血小板源性生长因子-BB对体外培养牛眼小梁细胞基质金属蛋白酶-2表达的影响

发布时间：2018-02-03 08:58

  本文关键词： 小梁细胞 血小板源性生长因子-BB 基质金属蛋白酶　出处：《滨州医学院》2012年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的： 探索完善的体外培养牛眼小梁细胞的方法,探讨血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)对体外培养牛眼小梁细胞增殖的影响及对细胞表面基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达的影响及意义。 方法： 对牛眼小梁细胞进行体外培养并鉴定(NSE、Ⅷ因子和FN的表达),用红血球计数法计数细胞,并绘制细胞生长曲线。获得三代对数生长期小梁细胞之后,分别用不同浓度的PDGF-BB (Ong/ml、5.0ng/ml、12.5ng/ml、25.0ng/ml)进行刺激干预。24小时后收集细胞,用SRB法和MTT法检测PDGF-BB对牛眼小梁细胞增殖的影响。然后分别采用RT-PCR法和免疫组织化学法观察PDGF-BB对培养2小时后牛眼小梁细胞MMP-2mRNA和蛋白表达水平的影响。 结果： 体外培养牛眼小梁细胞NSE、FN染色呈阳性,Ⅷ因子染色呈阴性,传三代细胞在接种第三天进入对数生长期,持续时间为三天左右。SRB和MTT法均显示随PDGF-BB浓度增加,小梁细胞增殖能力明显增强,呈良好的线性关系,统计学分析显示有统计学意义(P0.05)。RT-PCR检测发现,随PDGF-BB浓度增加,牛眼小梁细胞MMP-2的mRNA表达水平明显升高(P0.05)；免疫组织化学检测发现,PDGF-BB能显著促进牛眼小梁细胞MMP-2的蛋白表达(P0.05)。 结论： 实验用牛眼小梁细胞,最好选择传三代小梁细胞,应采用传代后三天左右的对数生长期细胞。PDGF-BB对体外培养牛眼小梁细胞的增殖有明显的促进作用。在体外培养的条件下,PDGF-BB可以引起牛眼小梁细胞MMP-2表达量的增加,可能对降低眼内压具有重要作用。
[Abstract]:Objective: Objective: to explore the method of cultured bovine trabecular meshwork cells in vitro and to explore platelet-derived growth factor-BB. The effect of PDGF-BBB on the proliferation of cultured bovine trabecular meshwork cells and on the matrix metalloproteinase-2 matrix metalloproteinase-2 on the surface of bovine trabecular meshwork cells was studied. The effect and significance of MMP-2 expression. Methods: Bovine trabecular meshwork cells were cultured in vitro to identify the expression of NSE, factor 鈪，

本文编号：1486958