人巨细胞病毒UL145相互作用蛋白的筛选和功能分析
本文选题：人巨细胞病毒 + UL蛋白 ； 参考：《中国医科大学学报》2017年04期
【摘要】：目的应用酵母双杂交系统筛选与人巨细胞病毒(HCMV)UL145编码蛋白相互作用的来源于人胎脑cDNA文库的组织蛋白。方法采用聚合酶链式反应扩增HCMV UL145片段,酶切及纯化扩增的目的片段及酵母表达载体p GBKT7,连接HCMV UL145片段及载体p GBKT7,将连接后的重组诱饵表达载体p GBKT7-UL145转化到酵母菌AH109中,再将人胎脑文库DNA也转化到酵母AH109中,筛选与HCMV UL145编码蛋白相互作用的蛋白,并对阳性克隆进行测序和生物信息学分析。结果最终确认多个克隆与HCMV UL145编码蛋白相互作用,BLAST结果显示3个与FOXG1高度同源。结论利用酵母双杂交系统成功筛选出与HCMV UL145编码蛋白相互作用的人胎脑c DNA文库蛋白FOXG1,推测该目的蛋白在HCMV感染所致神经系统损伤过程中起重要作用。
[Abstract]:Objective to screen the histone derived from human fetal brain cDNA library interacting with human cytomegalovirus (HCMV) UL145 protein by yeast two-hybrid system. Methods the HCMV UL145 fragment was amplified by polymerase chain reaction, the target fragment was digested and purified, and the yeast expression vector pGBKT7 was ligated to ligate the HCMV UL145 fragment and the vector pGBKT7. The recombinant bait expression vector p GBKT7-UL145 was transformed into the yeast AH109. Then the human fetal brain library DNA was transformed into yeast AH109 to screen the proteins interacting with HCMV UL145 coding protein, and the positive clones were sequenced and analyzed by bioinformatics. Results finally, three clones were confirmed to interact with HCMV UL145 coding protein. The results showed that three clones were highly homologous to FOXG1. Conclusion the human fetal brain c DNA library protein FOXG1 interacting with HCMV UL145 coding protein was successfully screened by yeast two-hybrid system. It is speculated that this protein plays an important role in nervous system injury induced by HCMV infection.
【作者单位】： 中国医科大学附属盛京医院生物样本库;吉林大学第一医院儿科;
【基金】：国家自然科学基金(81171581)
【分类号】：R373
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，本文编号：1781863
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