恒河猴骨髓间充质干细胞的培养与鉴定
本文选题:间质干细胞 + 恒河猴 ; 参考:《中国组织工程研究》2017年29期
【摘要】:背景:关于恒河猴骨髓间充质干细胞的研究结果很有限,来自幼年恒河猴骨髓间充质干细胞的分化潜力仍然未知。目的:探讨体外分离培养的恒河猴骨髓间充质干细胞生物学特性,对其生长曲线和表型进行初步鉴定。方法:采用密度梯度离心法和全骨髓贴壁培养法提取培养幼年恒河猴骨髓间充质干细胞,利用MTS法绘制第2,7代骨髓间充质干细胞生长曲线,利用流式细胞仪分析法检测第3代骨髓间充质干细胞凋亡及第4代骨髓间充质干细胞表面标志物CD29、CD34、CD45、CD90、CD147表达,检测第3代骨髓间充质干细胞的成骨及成脂分化能力。结果与结论:①第2,7代骨髓间充质干细胞在培养第一二天为潜伏期,第3-7天为对数生长期,第8天后细胞增殖逐渐减慢,进入平台期,第7代细胞增殖能力弱于第2代;②骨髓间充质干细胞表面标志物CD90、CD29、CD147呈阳性表达,CD34、CD45呈阴性表达;③流式细胞仪细胞凋亡检测结果显示,73.83%为活细胞,21.76%为死亡细胞,4.27%为凋亡细胞;④骨髓间充质干细胞可诱导分化为成骨细胞与成脂细胞;⑤结果表明,分离培养的恒河猴骨髓间充质干细胞生长活跃,有较强的增殖及多向分化能力。
[Abstract]:Background: the results of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) in rhesus monkeys are very limited. The differentiation potential of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) from young rhesus monkeys is still unknown. Objective: to investigate the biological characteristics of bone marrow mesenchymal stem cells isolated from rhesus monkeys in vitro and to identify their growth curves and phenotypes. Methods: bone marrow mesenchymal stem cells of young rhesus monkeys were cultured by density gradient centrifugation and whole bone marrow adherent culture. The growth curves of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) of the 2nd and 7th generation were plotted by MTS method. The apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) in the third generation and the expression of CD29, CD34, CD45, CD45, CD90, CD147 were detected by flow cytometry. The osteogenesis and adipogenic differentiation of the third generation bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were detected. Results and conclusion the first and second generation of bone marrow mesenchymal stem cells were incubated in the first and second days and the logarithmic growth period in the 3-7 days. After 8 days, the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells gradually slowed down and entered the plateau phase. The proliferation ability of the seventh generation cells was weaker than that of the second generation. 2 the positive expression of CD90, CD29, CD147, a marker on the surface of bone marrow mesenchymal stem cells, and the negative expression of CD34, CD45, and the results of apoptosis by flow cytometry showed that 73.83% were living cells and 21.76% were dead cells and 4.27% were apoptotic cells. (4) Bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) could be induced to differentiate into osteoblasts and adipoblasts. The results showed that bone marrow mesenchymal stem cells isolated and cultured from rhesus monkeys were active in growth and had strong ability of proliferation and multidirectional differentiation.
【作者单位】: 昆明医科大学第四附属医院云南省第二人民医院眼科;中国医学科学院昆明医学生物研究所灵长类研究中心;
【基金】:云南省应用基础研究面上项目(昆医联合专项)(2013FB109,2014FB074):恒河猴自体骨髓间充质干细胞在体诱导为角膜内皮样细胞的实验研究,恒河猴自体骨髓间充质干细胞体外诱导分化为角膜内皮样细胞~~
【分类号】:R329.2
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,本文编号:1968714
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