HBx抑制IGFBP3转录的机制

发布时间：2018-06-09 01:06

  本文选题：HBx + IGFBP　； 参考：《微生物学报》2017年12期

【摘要】：【目的】在细胞水平上研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)转录的影响并对具体机制进行初步探索。【方法】首先采用RNA-Deep-Sequencing技术分析HepG2和乙型肝炎病毒(HBV)转基因细胞HepG2-4D14中表达差异的基因,然后通过实时定量PCR对相关基因进行验证;利用启动子报告基因分析,研究HBx对相关基因IGFBP3转录的调控;通过染色质免疫共沉淀方法,分析HBx抑制IGFBP3启动子活性的机制。【结果】RNA-Deep-Sequencing的结果表明IGFBP3在HBV转基因细胞HepG2-4D14中水平显著下调,实时定量PCR结果与RNA-Deep-Sequencing一致。进一步研究表明HBx能明显抑制IGFBP3的转录,通过实时定量PCR发现HBx对IGFBP3转录的抑制作用依赖于p53;染色质免疫共沉淀实验结果表明HBx能够通过抑制p53与IGFBP3启动子的结合,从而抑制IGFBP3的转录。IGFBP3是一种细胞周期负调控蛋白,我们推测HBx对IGFBP3水平的下调是其促进细胞增殖的途径之一。【结论】HBV能显著下调IGFBP3的转录,机制研究揭示HBV HBx通过干扰p53与IGFBP3启动子的结合进而抑制IGFBP3的转录。
[Abstract]:[objective] to study the effect of hepatitis B virus X protein (HBX) on insulin-like growth factor-binding protein (IGFBP3) transcription and explore the specific mechanism at the cellular level. [methods] the RNA-Deep-Sequencing technique was used to analyze HepG2 and B at first. The differentially expressed genes were expressed in HepG2-4D14 transgenic HepG2-4D14 cells. Then the related genes were verified by real-time quantitative PCR, the regulation of IGFBP3 transcription by HBX was studied by promoter reporter gene analysis, and the chromatin immunoprecipitation method was used. The mechanism of HBX inhibiting the activity of IGFBP3 promoter was analyzed. [results] RNA-Deep-Sequencing showed that IGFBP3 was significantly down-regulated in HepG2-4D14, and the real-time quantitative PCR results were consistent with RNA-Deep-Sequencing. Further studies showed that HBX could significantly inhibit the transcription of IGFBP3, the inhibition of HBX on IGFBP3 transcription was dependent on p53 by real-time quantitative PCR, and the results of chromatin immunoprecipitation showed that HBX could inhibit the binding of p53 to IGFBP3 promoter. Therefore, inhibiting the transcription of IGFBP3. IGFBP3 is a negative cell cycle regulatory protein. We speculate that the down-regulation of IGFBP3 level by HBx is one of the pathways to promote the proliferation of IGFBP3. [conclusion] HBV can significantly down-regulate the transcription of IGFBP3. It is revealed that HBV HBX inhibits the transcription of IGFBP3 by interfering with the binding of p53 to IGFBP3 promoter.
【作者单位】： 中国科学院微生物研究所;中国科学院大学;
【基金】：国家重点基础研究发展计划(2015CB910502) 国家自然科学青年基金(31600129)~~
【分类号】：R373.21

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本文编号：1998086