重组B群脑膜炎球菌fHBP融合蛋白的表达和免疫原性研究
本文选题:脑膜炎奈瑟氏菌 + fHBP ; 参考:《中国生物工程杂志》2011年05期
【摘要】:采用PCR构建编码B群脑膜炎球菌fHBP蛋白V1变异型全长序列和V2变异型C结构域抗原表位融合蛋白的基因片段。并克隆入pET30a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),在其实现表达,表达量约占菌体蛋白总量的30%。表达产物经离子交换层析纯化后,获得了纯度达到90%以上的融合蛋白。将融合蛋白免疫小鼠,对其免疫原性进行了初步分析。结果显示,经2次腹腔免疫,血清IgG滴度达到15 849,同时杀菌力实验显示此融合蛋白能诱导针对B群脑膜炎球菌的补体依赖的杀菌反应。表明此融合蛋白具有较好的免疫原性,为B群脑膜炎球菌蛋白疫苗的研究提供了一定的理论基础。
[Abstract]:The full-length sequence of V1 variant of group B meningococcal fHBP protein and the fusion protein fragment of V2 variant C-domain antigen epitope were constructed by PCR. It was cloned into pET30a () vector and transformed into E. coli BL21 (DE3) and expressed in E. coli BL21 (DE3). After purification by ion exchange chromatography, the fusion protein with purity of more than 90% was obtained. The immunogenicity of mice immunized with fusion protein was preliminarily analyzed. The results showed that the titer of serum IgG reached 15849 after twice intraperitoneal immunization, and the bactericidal effect test showed that the fusion protein could induce complement dependent bactericidal reaction against meningococcus. The results showed that the fusion protein had good immunogenicity and provided a theoretical basis for the study of meningococcal protein vaccine.
【作者单位】: 北京协和医学院/中国医学科学院医学生物学研究所;
【基金】:云南省自然科学基金资助项目(2009ZC186M)
【分类号】:R392.1
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,本文编号:2117904
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