奥卡西平对癫痫大鼠认知功能和iNOS、Caspase-3的影响

发布时间：2018-11-04 13:36

【摘要】：奥卡西平(Oxcarbazepine, OXC)作为一种新型抗癫痫药物,主要用于癫痫部分性发作、全身痉挛发作的单独治疗和难治型癫痫的联合治疗。具有口服吸收快速、生物利用度高、副作用小等优点,在临床上应用越来越广泛。其可能作用机制为：①抑制电压门控型钠离子通道的开放,减少钠离子内流,抑制神经元的重复放电和细胞内cAMP的生成,降低神经兴奋性,减少突触冲动传播,增加细胞稳定性；②通过调节高电压激活型钙离子通道,减少兴奋性神经递质谷氨酸的释放进而减少癫痫发作的产生。Saber等通过对新发的癫痫患者给予奥卡西平或者其他抗癫痫药物的研究,4个月后进行评估,发现奥卡西平在智力、注意力、学习记忆、语言视觉等方面均无明显损害作用,且奥卡西平和卡马西平合用在学习记忆方面还有明显改善作用。另有学者通过应用双盲对照研究方法观察奥卡西平对癫痫患者的记忆力、注意力等方面的影响,结果显示其对认知功能也无明显损害作用。为了进一步了解奥卡西平对认知功能的作用,采用戊四氮致痫大鼠模型,通过水迷宫实验评价大鼠认知功能的变化。 癫痫持续发作可造成神经细胞功能损伤,越来越多的研究表明在癫痫发作致脑损伤中,细胞凋亡(apoptosis)具有重要作用。细胞凋亡即程序性细胞死亡,是在相关基因控制下自发的一种细胞死亡过程。其中Caspase蛋白是细胞凋亡的执行者,其核心酶Caspase-3的出现作为细胞凋亡的标志。作为一种性质及其活泼的NO由一氧化氮合酶(NOS)催化生成,存在时间较短,在中枢神经系统中起到复杂而重要的作用。有学者认为癫痫发作后脑损伤产生的NOS为不依赖钙的诱导型一氧化氮合酶,其可产生过量的NO引起神经细胞凋亡。 本课题通过建立大鼠癫痫模型,并给予奥卡西平干预,然后应用Morris水迷宫实验测试各组大鼠学习及记忆能力,应用免疫组化技术观察癫痫发作后不同时间诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及Caspase-3的表达变化,通过将动物行为学测试和组织切片病理学检查相结合的方法来探讨奥卡西平对癫痫大鼠的神经保护作用,为临床预防癫痫发作所致的神经细胞功能损害提供实验依据。 目的： 探讨奥卡西平(OXC)对戊四氮(PTZ)致痫大鼠认知功能的保护作用及对神经元诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和Caspase-3的表达及相互关系。 方法： 健康雄性Wistar大鼠52只随机分成4组：A组生理盐水组(NS)组,B组癫痫(epilepsy, EP)+NS组,C组EP+OXC组,D组OXC组.B组、C组连续5d腹腔注射PTZ60mg/kg,根据Racine分级方法以连续5d出现Ⅳ-Ⅴ级癫痫发作,且发作连续时间大于3-5min为癫痫模型制备成功。从第6天开始,A组、B组予NS灌胃,C组、D组给予OXC灌胃。每组随机取8只大鼠为免疫组化亚组,分别于喂药满6h、3d、7d、12d处死动物取脑,脑组织行免疫组化观察各组大鼠脑神经细胞iNOS及Caspase-3的表达变化；余为水迷宫亚组,于喂药后第3-6d 9-12d行水迷宫实验,观察比较大鼠空间认知及学习记忆情况。 结果： 1.实验组大鼠给予戊四氮腹腔注射均出现抽搐,成功率100%,其中死亡5只,死亡率9.6%。 2. Morris水迷宫实验 PNT: 第一时间段试验(喂药3-5d)：EP+NS组与NS组相比较,逃避潜伏期时间延长,差异有统计学意义(P0.05)；EP+OXC组在用药第3d与NS组相比较,逃避潜伏期时间延长,差异有统计学意义(P0.05)；EP+OXC组在用药第5d与NS组相比较,逃避潜伏期时间缩短,差异有统计学意义(P0.05)；EP+OXC组在用药第4d和第5d与EP+NS组相比较,逃避潜伏期时间缩短,差异有统计学意义(P0.05) 第二时间段试验(喂药第9-11d):EP+NS组与NS组相比较,逃避潜伏期时间延长,差异有统计学意义(P0.05)；EP+OXC组在用药第9d和第10d与NS组相比较,逃避潜伏期时间延长,差异有统计学意义(P0.05),且与EP+NS组比较,逃避潜伏期时间缩短,差异有统计学意义(P0.05)； SPT：大鼠跨越平台象限次数的结果：与NS组比较,EP+NS组大鼠跨越平台次数明显减少,差异有统计学意义(P0.05)；EP+OXC组与EP+NS组比较,跨越平台次数无明显差异,差异无统计学意义(P0.05) 3.免疫组织化学染色 iNOS免疫反应产物呈棕褐色,主要分布于神经元细胞浆内。Caspase-3主要分布于神经元胞浆内,呈棕黄色。EP+NS组iNOS阳性表达产物较其他组明显增多,6h、3d、7d组显著增多,其中以6h最为显著；EP+NS组Caspase-3阳性表达产物增多,6h、3d、7d组显著增多,其中以7d组最为显著。 4.免疫组化阳性产物平均光密度 与NS组比较,OXC组iNOS和caspase-3的平均光密度差异均无统计学意义(P0.05), EP+NS组caspase-3的平均光密度差异显著(P0.01),EP+NS组iNOS平均光密度6h、3d、7d差异显著(P0.01)。与EP+NS组相比,EP+OXC组caspase-3的平均光密度(7d、12d)差异显著(P0.01),EP+OXC组iNOS的平均光密度(3d、7d、12d)差异显著(P0.01) 结论： 奥卡西平有明确抗癫痫作用且对认知功能有一定保护作用,其可能机制通过降低神经细胞iNOS和Caspase-3的表达而发挥神经保护作用；奥卡西平不影响正常大鼠的认知功能。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R742.1;R-332

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 施旭来,胡鸿文,李光乾,陈翔,叶秀云,林忠东;癫痫和热性惊厥病儿一氧化氮一氧化氮合酶的研究[J];中国当代儿科杂志;2004年05期

2 庞启明;赵桂杰;;癫痫患儿血浆中一氧化氮和内皮素水平及其相关性研究[J];中国医药导刊;2011年01期

3 刘建丰;癫痫对认知功能的影响[J];国外医学.神经病学神经外科学分册;2003年05期

4 彭金玲,杨传友,王春阳;癫痫患者心理健康状况与认知功能研究[J];河南实用神经疾病杂志;2001年05期

5 苏怡凡,王建平,陈虹,顾彩兰;癫痫和高热惊厥患儿血清NO、NOS、MDA水平的比较及分析[J];兰州医学院学报;2004年01期

6 洪震,黄茂盛,王蓓;癫vN患者的认知功能状况分析[J];临床神经电生理学杂志;2002年02期

7 刘月影;邓星强;徐庄剑;李瑞;;癫vN发作过程中一氧化氮合酶与细胞凋亡的关系[J];实用儿科临床杂志;2007年23期

8 朱晓琴;李正莉;姜昌富;卫向红;王效静;;IL-1β或IL-6致痫对大鼠大脑皮质一氧化氮合酶表达的影响[J];华中科技大学学报(医学版);2006年01期

9 陈立光;刘滨;范海涛;贾践博;庞琦;;锂-匹罗卡品致痫大鼠海马结构nNOS、iNOS及活化Caspase-3蛋白表达的动态变化[J];山东大学学报(医学版);2010年11期

10 刘月影;邓星强;李瑞;袁宝强;;癫痫发作过程中细胞内钙、一氧化氮合酶与细胞凋亡的关系[J];江苏医药;2009年02期

，

本文编号：2309975