麻疹—结核苗的初步研究及CpG-ODN与PolyICLC在结核疫苗中的佐剂效应

发布时间：2019-01-23 11:16

【摘要】：初步对麻疹-结核联合疫苗进行研究，同时观察TLR识别配体不同组合佐剂对结核分枝杆菌融合蛋白免疫原性的影响，及DDA对TLR识别配体的辅助效应。麻疹弱毒苗与麻疹灭活苗分别与融合蛋白Mtb10.4-HspX（MH）混合，制备联合疫苗，并以MH作为对照;同时，CpG-ODN（CpG）和/或PolyICLC联合/不联合DDA，分别与融合蛋白Mtb10.4-HspX（MH）混合，制备亚单位疫苗，于第1、4、7周皮下免疫C57BL/6小鼠。以PBS和BCG（仅免疫1次）作为对照。末次免疫后6周，采血检测血清抗体水平，并分离脾淋巴细胞，检测分泌IFN-γ的淋巴细胞水平。 经MH，HspX及PPD抗原刺激后，，MH+MV1组分泌IFN-γ的细胞数高于MH+MV2组（P0.05），而MH+MV2组分泌IL-4的细胞数高于MH+MV1组（P0.05）;两种联合疫苗组均可诱导产生的抗MH及HspX的IgG1、IgG2b、IgG2c水平均明显高于BCG组（P0.05），且各联合疫苗组IgG2c/IgG1均高于BCG组（P0.05）。 经MH及HspX抗原刺激后，MH+CpG+PolyICLC+DDA组小鼠分泌IFN-γ的脾淋巴细胞数高于其它各组（P0.05），MH+CpG+PolyICLC组其次，显著高于MH+CpG及MH+PolyICLC组（P0.05）；联合DDA佐剂组均分别高于对应的未联合DDA佐剂组（P0.05）。各亚单位疫苗组诱导产生的抗MH及HspX的IgG1、IgG2b、IgG2c水平均明显高于BCG组（P0.05），其中MH+CpG+PolyICLC+DDA组三种抗体水平最高；各亚单位疫苗组IgG2c/IgG1均高于BCG组（P0.05）。 结果表明，麻疹弱毒-结核联合疫苗可诱导产生较高的细胞免疫应答，同时CpG+PolyICLC+DDA佐剂增强了结核分枝杆菌融合蛋白的免疫原性；CpG和PolyICLC具有佐剂协同作用；DDA有助于CpG和/或PolyICLC诱导特异性细胞免疫应答。
[Abstract]:The effect of different adjuvants of TLR recognition ligand on the immunogenicity of Mycobacterium tuberculosis fusion protein and the auxiliary effect of DDA on TLR recognition ligands were studied. Measles attenuated vaccine and inactivated measles vaccine were mixed with fusion protein Mtb10.4-HspX (MH) to prepare combined vaccine, and MH was used as control. At the same time, CpG-ODN (CpG) and / or PolyICLC combined / uncombined DDA, were mixed with the fusion protein Mtb10.4-HspX (MH) to prepare subunit vaccine. C57BL/6 mice were subcutaneously immunized at the 1st week of 4th week. PBS and BCG (immunized only once) were used as control. At 6 weeks after the last immunization, the serum antibody level was measured, and the spleen lymphocytes were isolated and the IFN- 纬 secreting lymphocytes were detected. After stimulation by MH,HspX and PPD antigen, the number of cells secreting IFN- 纬 in MH MV1 group was higher than that in MH MV2 group (P0.05), while the number of IL-4 secreting cells in MH MV2 group was higher than that in MH MV1 group (P0.05). The IgG1,IgG2b,IgG2c levels of MH and HspX induced by two combined vaccine groups were significantly higher than those of BCG group (P0.05), and IgG2c/IgG1 of each combined vaccine group was higher than BCG group (P0.05). The number of spleen lymphocytes secreting IFN- 纬 in, MH CpG PolyICLC DDA group after stimulation with MH and HspX antigen was higher than that in other groups (P0.05), MH CpG PolyICLC group, significantly higher than MH CpG and MH PolyICLC group (P0.05); The combined DDA adjuvant group was higher than the corresponding DDA adjuvant group (P0.05). The levels of IgG1,IgG2b,IgG2c against MH and HspX induced by each subunit vaccine group were significantly higher than those of BCG group (P0.05), in which the MH CpG PolyICLC DDA group had the highest level of three kinds of antibodies; the IgG2c/IgG1 level of each subunit vaccine group was higher than that of BCG group (P0.05). The results showed that the combined measles attenuated virus / tuberculosis vaccine could induce a higher cellular immune response, and CpG PolyICLC DDA adjuvant enhanced the immunogenicity of Mycobacterium tuberculosis fusion protein, while CpG and PolyICLC had synergistic effects. DDA helps CpG and / or PolyICLC induce specific cellular immune responses.
【学位授予单位】：甘肃农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R392

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本文编号：2413729