氟西汀对内皮素-1诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡失衡的保护机制

发布时间：2019-02-14 13:44

【摘要】：目的：观察氟西汀对内皮素-1诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡失衡的逆转作用并探讨其可能的机制。 方法：实验用细胞分成四组：空白组(Blank):含2%胎牛血清的高糖DMEM培养液,不加任何干预剂；内皮素-1组(ET-1)：含2%胎牛血清的高糖DMEM培养液,其中加入ET-1,终浓度为0.1μM；内皮素-1+氟西汀组(ET-1+F):含2%胎牛血清的高糖DMEM培养液,加入ET-1+Fluoxetine,终浓度分别为O.1μM,1.0μM；氟西汀组(F)：含2%胎牛血清的高糖DMEM培养液,其中加入Fluoxetine,终浓度为1.0μM。干预72小时后,分别检测各组凋亡率,TRPC1、Caspase-3、Bcl-2、 Bcl-x1和kv1.5等基因的表达。 结果：同空白组比较,内皮素组平滑肌细胞增殖显著,TRPCI表达明显增强(1.2448±0.2157VS0.6572±0.1076,P0.01),凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-x1表达增加,凋亡率显著下降(1.1±0.1634vs2.3834±0.0703,P0.01),凋亡相关基因表达减少Caspase-3,kV1.5信使RNA、蛋白(0.0303±0.0034VS0.0661±0.0051,P0.05,1.2198±0.1016VS2.5717±0.1557,P0.001).加入氟西汀干预后,较内皮素干预组,ET-1+F组平滑肌增殖明显抑制,各种基因表达显著逆转,TRPC1(0.7904±0.1043vs1.2448±0.2157,P0.051,Bcl-2、Bcl-xl,凋亡率(4.85±0.3852vs1.1±0.1634, P0.001),Caspase-3,kv1.5信使RNA、蛋白(0.1648±0.0087vs0.0303±0.0034, P0.001；2.1234±0.1766vs1.2198±0.1016,P0.001). 结论：氟西汀逆转由内皮素-1诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的失衡,其可能的机制是通过下调TRPC1的表达增加kv1.5的表达和活性,抑制细胞增殖,并上调Caspase-3的表达,促进细胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to investigate the reversal effect of fluoxetine on endothelin-1 induced proliferation and apoptosis of human pulmonary artery smooth muscle cells (PASMC) and its possible mechanism. Methods: the cells were divided into four groups: blank group (Blank): containing 2% fetal bovine serum high sugar DMEM culture medium without any intervention; Endothelin-1 group (ET-1): high glucose DMEM medium containing 2% fetal bovine serum, in which the final concentration of ET-1, was 0.1 渭 m; In the endothelin-1 fluoxetine group (ET-1 F): containing 2% fetal bovine serum) high glucose DMEM medium, the final concentration of ET-1 Fluoxetine, was 0. 1 渭 m ~ (-1). In fluoxetine group, (F): contained 2% fetal bovine serum and high glucose DMEM medium, in which the final concentration of Fluoxetine, was 1.0 渭 M. After 72 hours of intervention, the apoptotic rate and the expression of TRPC1,Caspase-3,Bcl-2, Bcl-x1 and kv1.5 were detected. Results: compared with the blank group, the proliferation of smooth muscle cells in endothelin group was significant, the expression of TRPCI was significantly increased (1.2448 卤0.2157VS0.6572 卤0.1076 P0.01), and the Bcl-2,Bcl-x1 expression of apoptosis suppressor gene was increased. The apoptotic rate decreased significantly (1.1 卤0.1634vs2.3834 卤0.0703, P0.01), and the expression of apoptosis-related genes decreased the expression of Caspase-3,kV1.5 messenger RNA, protein (0.0303 卤0.0034VS0.0661 卤0.0051 P0.05N 1.2198 卤0.1016VS2.5717 卤0.1557 P0.001). After fluoxetine was added, smooth muscle proliferation and gene expression in ET-1 F group were significantly inhibited, and TRPC1 (0.7904 卤0.1043vs1.2448 卤0.2157 P0.051) Bcl-xl, and Bcl-xl were significantly inhibited in ET-1 F group compared with those in endothelin group. Apoptosis rate (4.85 卤0.3852vs1.1 卤0.1634, P0.001), Caspase-3,kv1.5 messenger RNA, protein (0.1648 卤0.0087vs0.0303 卤0.0034, P0.001); 2.1234 卤0.1766vs1.2198 卤0.1016g P0.001). Conclusion: fluoxetine can reverse the imbalance of proliferation and apoptosis of human pulmonary artery smooth muscle cells induced by endothelin-1. The possible mechanism of fluoxetine is to increase the expression and activity of kv1.5 by down-regulating the expression of TRPC1 and inhibit the proliferation of human pulmonary artery smooth muscle cells. The expression of Caspase-3 was upregulated and apoptosis was promoted.
【学位授予单位】：武汉大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R363

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本文编号：2422258