纤维蛋白胶携载的粒细胞集落刺激因子促进大鼠缺血后肢血管再生的作用

发布时间：2019-02-22 14:16

【摘要】：目的：研究肌注纤维蛋白胶携载的粒细胞集落刺激因子(Gel+G-CSF)对大鼠外周血白细胞总数和缺血下肢血管再生的影响。 材料与方法： 1、于EP管中将纤维蛋白胶主体（加入了G-CSF）和催化剂混合制成凝胶块，加入PBS液，于37℃下恒温孵育。分别于24、48、72、96h各时间点用ELISA试剂盒检测PBS释放液中G-CSF浓度，计算G-CSF的累积释放率。 2、雄性SD大鼠30只，制成大鼠后肢缺血模型，成模后随机分3组:Gel+G-CSF组（n=10）、G-CSF组（n=10）和PBS组（n=10），分别肌肉注射Gel+G-CSF、G-CSF和PBS。于造模术前及术后第1、3、5、7天计数外周血白细胞总数，于造模后的第1周和第4周每组分别处死5只大鼠，取肌组织冰冻切片行碱性磷酸酶染色、苏术素染色、　α-SMA和VEGF免疫组化染色，观察毛细血管、细胞浸润情况、α-SMA阳性血管和VEGF表达情况；计数毛细血管和α-SMA阳性血管密度。 结果： 1、Gel+G-CSF体外释放情况：Gel+G-CSF在24h、48h和72h的累计释放率约52.5±4.50%、76.3±4.47%、87.9±4.38%，Gel+G-CSF在72h内逐渐缓释出大部分的G-CSF。 2、外周血白细胞数的变化：Gel+G-CSF组外周血白细胞总数在术后第1天达峰值（14.69±1.11×109/L）且明显低于G-CSF组在术后第3天达到的峰值（21.00±2.26×109/L）。 3、促血管再生作用：Gel+G-CSF组（686±108/mm2）的毛细血管密度明显高于G-CSF组（491±110/mm2）和PBS组（252±78/mm2），P0.05。Gel+G-CSF组（6.1±0.8/mm2）的α-SMA阳性血管密度明显高于PBS组（2.6±1.3/mm2），P0.05。 4、促细胞浸润及VEGF表达作用：Gel+G-CSF组肌组织内浸润的细胞数和VEGF表达细胞数明显高于G-CSF组和PBS组。 结论： Gel+G-CSF可以促进大鼠缺血后肢肌组织细胞的浸润，，并使其活化分泌VEGF来促进血管再生。肌注Gel+G-CSF与肌注G-CSF相比，其血管再生作用强，而外周血白细胞数升高的副作用小。
[Abstract]:Aim: to study the effects of intramuscular injection of granulocyte colony-stimulating factor (Gel G-CSF) loaded with fibrin glue on the total number of leukocytes in peripheral blood and vascular regeneration of ischemic lower extremity in rats. Materials and methods: 1. The fibrin glue (G-CSF) was mixed with catalyst in EP tube to form gel block, then PBS solution was added, and incubated at 37 鈩

本文编号：2428308