高抗氧化微生物筛选及其延缓小鼠衰老的研究

发布时间：2019-05-13 23:05

【摘要】：本论文利用一些经体外筛选具有高抗氧化活性菌株及其产物进行一系列的研究。首先,对不同来源食品中分离纯化的26株菌进行清除羟自由基和DPPH自由基试验,初筛出抗氧化性较高的4株乳酸菌和6株酵母菌,然后对这10株菌进行清除超氧自由基、还原能力测定、抗脂质过氧化试验,分析其抗氧化性能以及复筛出具有更强的抗氧化性菌株；其次,针对这些菌株及其发酵液进行抗氧化主效成分分析,选择优良菌株进行后续实验；再次,建立D-半乳糖小鼠衰老模型,并且通过灌胃这些菌株及发酵液研究小鼠机体内抗衰老的作用。主要研究结果如下： (1)通过清除DPPH、羟基自由基这两种测定方法,从26个菌株中初筛出较高抗氧化性乳酸菌(L1-L4)和酵母菌(Y3. Y5、Y9、Y8、Y12、Y13),然后分别针对其菌体和发酵液进行进一步抗氧化性能分析,其中L1、L2除了清除超氧自由基能力外在其他测定方法中的抗氧化活性均较高,而Y3、Y5在后续的三个实验中表现较稳定,抗氧化活性均较高。故选择乳酸菌L1、L2和酵母菌Y3、Y5进行后续的研究。 (2)菌体破碎液及其发酵液抗氧化物质分析：在多糖含量方面,Y3(188.5ug/mL)、Y5(345.1ug/mL)其发酵液中多糖含量高于L1(124.0ug/mL)、L2(112.4ug/mL),其中Y5发酵液最高；在Vc含量方面,四个菌株Vc含量非常低,可以忽略不计；黄酮含量方面,Y3(10.24ug/mL)、Y5(5.12ug/mL)发酵液中黄酮和多酚含量要低于L1(68.86ug/mL)和L2(45.06ug/mL),而其破碎液中的多酚含量远高于L1、L2。在多酚含量方面,L1、L2菌体破碎液中多酚含量远远比其发酵液要低,而Y3、Y5则相反；在SOD活力方面,菌体破碎液的酶活力远远比发酵液高,其中Y3酶活力最高。因此,选择Y3、Y5的菌体破碎液和L1、Y3的发酵液作为小鼠灌胃的实验对象。 (3)D-半乳糖致小鼠衰老模型的建立：中、高剂量组的相关指标值与衰老组比较接近,但由于高剂量组在实验过程有2只小鼠死亡,所以选择中剂量为最适剂量(650mg/kg),注射时间为6周。 (4)菌体悬液及其发酵液对小鼠衰老模型的研究：在小鼠增重和脏器指数方面,模型组、L1发酵液组、Y5菌体组、Y3发酵液组、Y3菌体组对小鼠生长增重分别为7.7g、8.1g、9.9g、8.7g、10.0g,模型组除心、肾指数外其他脏器指数比普通组要低,并且各组不同脏器指数影响程度不同；在其他方面,L1发酵液组在一定程度上提高小鼠的心、肝、脾、脑组织的T-AOC活力,Y5菌体组(11.3U/mgprot)对小鼠肝组织亦是如此。Y5菌体组(9.3U/mgprot)能够一定程度的提高小鼠血清T-AOC活力；L1发酵液组、Y5菌体组、Y3发酵液组、Y3菌体组能够相应地提高GSH-PX酶活力；Y3菌体组对脑的POD活力有所提高,L1发酵液组、Y5发酵液组对心的POD活力有所提高,其他组织POD活力效果没有差异性。Y3发酵液组对心的CAT活力有一定程度的提高,L1发酵液组、Y5菌体组对肾组织中CAT酶活力有所提高；L1发酵液、Y5菌体组能够降低肝、脾、肾、脑MDA的含量,Y3发酵液组(3.6nmol/mL)、Y5菌体组(10.6nmol/mL)在血清方面对降低MDA含量有一定的作用；除Y3发酵液组以外,其他组的样液对小鼠在血清的MAO活性的降低都有一定程度的作用；Y5菌体组(3.2mmol/L)、Y3发酵液组(3.6mmol/L、Y3菌体组(3.0mmol/L)对血清总胆固醇含量的降低都有一定程度的作用。L1发酵液、Y3发酵液、Y5菌体、Y3菌体能够在一定程度上延缓小鼠衰老。
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【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R378

【参考文献】