基于微滴式数字PCR技术的甲型流感病毒绝对定量方法的建立及应用

发布时间：2019-06-21 04:41

【摘要】：数字PCR(Digital PCR,dPCR)是核酸绝对定量的新方法,然而,基于dPCR的甲型流感病毒(Influenza A virus,FluA)绝对定量方法还未系统建立。本研究首先对微滴式dPCR的退火温度进行了梯度优化,确定了dPCR反应的最佳退火温度为64.4℃;利用FluA核酸标准品,确定了微滴式dPCR对FluA的检测范围为37.7~8.22"104拷贝/#L,检测的检出限为3.77拷贝/反应。微滴式dPCR的检测结果与标准品拷贝数的相关系数为R2=0.9988,提示该方法检测结果具有较高的可信度。用建立好的微滴式dPCR方法可对待测临床样本中的FluA进行了拷贝数定量。因此本研究建立了基于微滴式dPCR的FluA绝对定量方法,可有效地对临床样本中甲型流感病毒载量进行绝对定量,为临床研究中病毒载量的测定提供了一种技术。
[Abstract]:Digital PCR (Digital PCR,dPCR) is a new method for absolute quantification of nucleic acid. However, the absolute quantitative method of influenza A virus (Influenza A virus,FluA) based on dPCR has not yet been systematically established. In this study, the annealing temperature of microdrop dPCR was optimized, and the optimum annealing temperature of dPCR reaction was 64.4 鈩，

本文编号：2503796