姜黄素在治疗过敏性鼻炎小鼠模型中的作用机制研究

发布时间：2017-03-16 10:01

  本文关键词：姜黄素在治疗过敏性鼻炎小鼠模型中的作用机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：姜黄素(Curcumin, CUR)在很多过敏性疾病的治疗中得到了很好的应用。而对过敏性鼻炎(allergic rhinitis, AR)作用机制的研究还不十分明确。本研究的目的是通过建立卵清蛋白(OVA)致敏的过敏性鼻炎小鼠模型,对其实施姜黄素干预,探讨姜黄素在过敏性鼻炎中的作用机制,为更好地治疗和护理过敏性鼻炎患者提供理论支持。方法：通过对试验小鼠采用腹膜内注射及鼻饲喂养OVA的方法,建立OVA致敏的过敏性鼻炎小鼠模型,在此基础上进行姜黄素鼻饲实施干预治疗,并与单纯OVA致敏组小鼠进行比较。根据实验目的,本课题中实验小鼠被分成四组：Control组(正常对照组)、OVA组(OVA致敏+鼻饲NSX CUR1组(OVA致敏+鼻饲姜黄素100mg/kg)和CUR2组(OVA致敏+鼻饲姜黄素200mg/kg),每组6只试验小鼠。通过观察记录比较小鼠20min内打喷嚏和鼻摩擦的次数,评估姜黄素对过敏性鼻炎小鼠的鼻部症状的影响；运用HE染色观察姜黄素对致敏小鼠的鼻粘膜组织变化的影响；运用ELISA法、Western Blot法及免疫组织化学法等评估姜黄素对致敏小鼠的过敏性炎症介质及炎性因子的影响。所有数据均采用均数±标准差(SD)表示,每个实验至少重复三次,应用Prism version 5软件包进行统计学分析,主要运用t检验和单因素方差分析,以P0.05为差异具有统计学意义。结果：1.姜黄素对OVA致敏小鼠鼻部症状及鼻粘膜组织损伤的影响鼻饲喂养3天后,比较各组小鼠20min内打喷嚏和鼻摩擦的频次记录。结果显示：CUR1组、CUR2组小鼠的打喷嚏和鼻摩擦数比OVA组的次数减少,并且CUR2组比CUR1组减少更加明显。运用HE染色观察姜黄素对鼻粘膜组织的影响,结果显示OVA组小鼠鼻粘膜的组织粘膜下层显示过敏性鼻炎的典型病理特征,粘膜下层含大量的炎性细胞,而CUR1、CUR2组的嗜酸性细胞的释放明显降低。结果表明姜黄素起到了减轻OVA致敏小鼠的鼻部症状,同时保护鼻粘膜免于损伤的作用。2.姜黄素对OVA致敏小鼠血清标志物的影响采用ELISA法,对OVA致敏小鼠血清中的过敏性介质组胺、抗OVA特异性IgE及TNF-α、Src激酶家族Fyn、Lyn以及Syk水平进行检测。检测结果显示：与OVA组相比,CUR1组和CUR2组的组胺水平、OVA特异性IgE水平、免疫细胞因子TNF-α的水平、Src激酶家族Fyn、Lyn以及Syk的血清水平均明显降低。以上结果表明姜黄素可以通过抑制血清中炎性介质的产生,从而起到抗炎症作用。3.姜黄素对OVA致敏小鼠相关炎症因子的作用采用ELISA法,分析姜黄素对HMC-I细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8等炎性因子释放的影响。检测结果显示：与OVA组相比,CUR1组和CUR2组中肥大细胞PMA介导的TNF-α, IL-1β、IL-6、IL-8的释放明显降低。这些结果表明姜黄素能通过抑制肥大细胞产生与过敏反应相关炎症因子而发挥抗炎作用。4.姜黄素对小鼠肥大细胞中NF-κ B p65核转录的作用影响过敏性炎症期间,MAPK分子和作为转录因子的NF-κ B的信号转导途径对肥大细胞炎症介质的合成和释放至关重要。本研究采用免疫印迹法对3种MAPK分子进行分析。检测结果显示：与OVA组相比,CUR1(100mg/kg)和CUR2(200mg/kg)能明显抑制PMA介导的ERK1/、P38MAPK、JNK的磷酸化,能降低细胞液中的Iκ-Bα的磷酸化及肥大细胞中NF-κ B p65的核转录水平。结果表明,在肥大细胞介导的过敏性炎症中,姜黄素对MAPK/NF-κ B途径中抑制炎症介质释放存在潜在的影响。结论：1.姜黄素能改善OVA致敏小鼠的鼻部症状及减轻鼻粘膜的受损。2.姜黄素能抑制OVA致敏小鼠血清中炎性介质的释放。3.姜黄素能抑制OVA致敏小鼠与过敏反应相关的炎性因子的产生。4.姜黄素能影响MAPK分子和作为转录因子的NF-κ B的信号转导途经,抑制肥大细胞的炎症介质的合成和释放。
【关键词】：过敏性鼻炎 姜黄素 卵清蛋白(OVA) 致敏小鼠模型 抗炎作用
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R276.1;R-332
【目录】：

• 中文摘要8-11
• ABSTRACT11-14
• 符号说明14-15
• 第一部分 前言15-18
• 1.1 研究背景15-17
• 1.2 研究问题17
• 1.3 研究的目的与意义17
• 1.4 研究的可行性17-18
• 第二部分 文献综述18-26
• 2.1 过敏性鼻炎的概念及分类18-19
• 2.2 过敏性鼻炎的致病原因及流行病学调查19-20
• 2.3 过敏性鼻炎的发病机制20
• 2.4 过敏性鼻炎的治疗现状20-23
• 2.4.1 过敏性鼻炎的西医治疗20-22
• 2.4.2 过敏性鼻炎的中医治疗22-23
• 2.5 患者护理健康教育指导23-24
• 2.6 姜黄素的药理作用及临床应用24-25
• 2.7 小结25-26
• 第三部分 资料和方法26-29
• 3.1 研究材料26
• 3.1.1 试验材料26
• 3.1.2 动物及分组26
• 3.2 建立OVA致敏的过敏性鼻炎模型26
• 3.3 实施姜黄素干预治疗26-27
• 3.4 研究工具27-28
• 3.4.1 鼻部症状评分27
• 3.4.2 鼻粘膜的组织学分析和心脏组织的免疫组织化学分析27
• 3.4.3 组胺、OVA特异性IgE、TNF-α和Src激酶的计算27-28
• 3.4.4 肥大细胞组胺释放量的计算28
• 3.4.5 细胞因子的测定28
• 3.4.6 免疫印迹法分析28
• 3.5 统计分析28-29
• 第四部分 研究结果29-37
• 4.1 姜黄素对OVA致敏大鼠的鼻部症状的影响29-31
• 4.2 姜黄素对OVA致敏大鼠血清标志物的影响31-33
• 4.3 姜黄素对肥大细胞释放的组胺和细胞因子的影响33-35
• 4.4 姜黄素对肥大细胞中信号传导途径的影响35-37
• 第五部分 讨论37-40
• 5.1 姜黄素在OVA介导的鼻炎中发挥抑制炎性介质释放的发挥抗炎作用37
• 5.2 姜黄素在OVA介导的鼻炎中抗炎及抗氧化作用37-38
• 5.3 姜黄素对肥大细胞核转录因子NF- K B转录活性的抑制作用38-40
• 第六部分 结论40-41
• 第七部分 研究的局限性与启示41-42
• 研究局限性41
• 对护理研究的度示41-42
• 参考文献42-46
• 致谢46-47
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文47-48
• 代表性学术成果48-65
• 学位论文评阅及答辩情况表65

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