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DENV-2感染小鼠ANA-1巨噬细胞补体mRNA动态和细胞极化的初探

发布时间:2017-03-16 12:01

  本文关键词:DENV-2感染小鼠ANA-1巨噬细胞补体mRNA动态和细胞极化的初探,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:目的:探讨DENV-2对小鼠ANA-1巨噬细胞胞内补体相关组分mRNA和细胞极化动态的影响。方法:用C6/36细胞增殖DENV-2, RT-PCR鉴定病毒,TCID50滴定病毒效价。分别以LPS/IL-4体外刺激小鼠ANA-1细胞3h、8h、12h及24h,Real-time PCR法检测IL-1β、CCL2、Arg-1细胞极化指标的变化,检测胞内C3、CfB、CRIg、Clq补体成分mRNA的动态。用DENV-2感染M0/M2极化的ANA-1巨噬细胞,Real-time PCR检测细胞的极化指标、NS1基因和Mavs抗病毒基因的表达,以及胞内补体C3、CRIg、Clq mRNA的动态。结果:1)细胞极化后补体mRNA动态:刺激3h后LPS组IL-1β、 CCL2 mRNA表达上调,12h达高峰;IL-4组中以Arg-1 mRNA表达上调显著,于24h达高峰,提示LPS组细胞向MI方向极化,IL-4组向M2方向极化。两极化组的相应补体组分均表现为不同程度的上调,其中:①C1q、C3在ANA-1向M2极化8h后上调显著,12h时达高峰(2-△△ct分别为94.9±12.9和11.34±2.4);②CfB因子在M1极化组中上调显著,12h表达上调达高峰(2-△△ct为61.4±6.2);③CRIg在两组中均在24h时表达上调且具有显著性差异(P0.05)。2)DENV-2感染M0/M2状态的ANA-I细胞后补体mRNA动态:①感染后C1qmRNA表达均受抑制,且M2感染组比M0感染组C1q表达均较高(差异具有统计学意义);②3h时M2感染组C3mRNA表达受抑制,12h时上调2-△△ct为5.08±2.25。与M0感染组相比,12h和24h时两组间差异有统计学意义;③除12h检测点外,DENV-2感染后CRIg表达均上调或在正常水平。④DENV-2感染后M2细胞CfB基因表达均被下调,但与感染M0组比较两组无明显差异。3) DENV-2感染后M0/M2状态的ANA-1细胞后细胞极化的动态:DENV-2感染M0细胞后IL-1β、CCL2和Arg-1表达均受抑制,Arg-I基因于24h时恢复正常。DENV感染逆转M2细胞Arg-I基因的表达。4)感染后胞内NS1、Mavs mRNA的动态:24h内各感染组间NS1和Mavs基因的表达差异无统计学意义。结论:1)不同极化ANA-1细胞表达补体成分mRNA不同:M1极化细胞较高表达CfB,M2极化细胞高表达C1q、C3和CRIg。2) DENV-2感染不同极化状态的细胞后补体mRNA表达的差异:DENV-2下调M2型ANA-1细胞C1q和C3的表达,而CRIg保持正常水平或表达上调;与感染的M0细胞相比,C1q、CRIg在M2感染组相对上调。3)DENV-2可逆转或延迟感染细胞的极化。4)感染后胞内补体mRNA的动态可能与病毒增殖、细胞抗病毒反应Mavs的变化无关。
【关键词】:DENV-2 巨噬细胞ANA-1 补体 NS1 Mavs
【学位授予单位】:贵州医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R392
【目录】:
  • 中文摘要4-6
  • 英文摘要6-9
  • 略缩词表9-10
  • 引言10-11
  • 材料与方法11-19
  • 结果19-33
  • 讨论33-39
  • 结论39-40
  • 参考文献40-44
  • 综述44-60
  • 参考文献53-60
  • 作者简历60-61
  • 附件61-63
  • 致谢63-64
  • 学位论文数据集64

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