p97在小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中作用的研究

发布时间：2017-03-16 13:03

  本文关键词：p97在小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：p97在动物体内被称为VCP(valosin-containing protein),在酵母内称为Cdc48p,秀丽隐杆线虫中称为CDC-48,这种蛋白质在所有的真核细胞中是非常保守的一种蛋白,且这种蛋白对于酿酒酵母,黑腹果蝇、秀丽隐杆线虫和小鼠的发育都是必须的。p97在细胞中的存在的量是巨大的,约占细胞内总蛋白量的1%。p97是泛素化选择分子伴侣,它的主要作用是打开折叠的蛋白质及将特定蛋白质复合物解聚,p97将ATP水解产生的化学能转换成将目标蛋白解聚和分离的机械能,p97在细胞的多种过程和活动中发挥重要色作用,例如:高尔基体、内质网、核膜的组装,内质网相关的降解(ERAD),泛素化蛋白酶降解途径,细胞周期调节,DNA修复,阻滞多聚谷氨酸的聚合,自噬体的成熟,和线粒体自噬,。P97的功能的多样性主要取决于它与不同的共因子和蛋白结合。有丝分裂中p97在DNA复制,极光激酶B定位,染色体分离,微管纺锤体的拆卸,核膜的重组。p97是一种多功能蛋白,且它的功能对于多种细胞,多种生物过程具有重要的作用,然而它对于卵母细胞减数分裂成熟过程中的作用还不是很清楚。我们的研究只在研究p97在卵母细胞减数分裂成熟过程中的作用。本研究的创新为应用免疫荧光技术证实p97在小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中发挥重要的作用。目的:研究p97在小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中作用。方法：1.Western Blot测定p97的蛋白表达水平,免疫荧光染色进行p97的各阶段减数分裂卵母细胞内定位,及对比分析对照空白组和经p97的抑制剂DBe Q处理后的昆明白鼠的卵母细胞的减数分裂过程的进展情况,检测CDC25a和CDC25b在经DBe Q处理后的卵母细胞中表达水平的变化。2.免疫荧光检测经DBe Q处理后的卵母细胞的染色体的分离情况,染色体铺片后观察经DBe Q处理后的卵母细胞的染色体的结构和数目的变化。结果:1.卵母细胞中p97功能受到抑制后导致卵母细胞GVBD受到抑制,且阻碍GVBD后卵母细胞的减数分裂的进程使卵母细胞停滞于MI期和ATI期。2.卵母细胞中p97的功能抑制后细胞核内的CDC25a,CDC25b的表达量下降。3.经DBe Q处理后的MI和MII期的小鼠卵母细胞出现异常的染色质的凝集,染色体的排列紊乱及染色体的不能正确分离。结论:1.p97参与小鼠的卵母细胞正常的减数分裂成熟过程的恢复。2.p97参与小鼠的卵母细胞GVBD后的减数分裂的进程。3.p97参与小鼠的卵母细胞减数分裂过程中的染色体的凝集、排列和分离。
【关键词】：卵母细胞 p97 减数分裂 免疫荧光 DBeQ
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R321
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 1 引言9-11
• 2 材料和方法11-15
• 3 实验结果15-22
• 4 讨论22-26
• 5 结论26-27
• 参考文献27-32
• 综述32-44
• 参考文献38-44
• 攻读学位期间的研究成果44-45
• 致谢45

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈壁锋,郑履康,张桥;三种生育调节剂对雌性小鼠卵母细胞及受精卵染色体的诱变作用[J];卫生毒理学杂志;1993年S1期

2 郑青，保毓书;二硫化碳对小鼠卵母细胞染色体的损伤作用[J];卫生毒理学杂志;1996年02期

3 李朝军,范必勤,张祖暄;小鼠卵母细胞体外成熟的形态变化[J];解剖学报;1997年01期

4 王松波,夏国良,卜淑敏,谢辉蓉,汪建红,郭勇;一氧化氮供体硝普纳对小鼠卵母细胞体外自发成熟的影响[J];中国实验动物学报;2003年02期

5 鄂玲玲;刘洪臣;王东胜;;不同激活方法对小鼠卵母细胞孤雌激活胚胎发育的影响[J];解放军医学杂志;2007年01期

6 吴嫦丽;李莉;卫恒习;吴珍芳;江青艳;张守全;;尾吊模型模拟微重力抑制小鼠卵母细胞的成熟[J];生物医学工程学杂志;2012年04期

7 郑青,保毓书;化学物质对小鼠卵母细胞染色体影响的研究[J];卫生毒理学杂志;1993年S1期

8 郑莉萍,汪小浪,郑月慧,吴磊;氯化锌对小鼠卵母细胞体外成熟的影响[J];江西医学院学报;2005年03期

9 毕晔;张克梅;;活细胞工作站技术在小鼠卵母细胞实时观察中的应用[J];临床检验杂志;2011年09期

10 李朝军，王斌，，范必勤;小鼠卵母细胞减数分裂过程中钙离子的三维分布[J];解剖学报;1995年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 卜淑敏;夏国良;谢辉蓉;郭勇;;卵丘细胞产生的一氧化氮促进小鼠卵母细胞的成熟[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年

2 朱孝荣;孙海燕;孙强;李厚达;;小鼠卵母细胞玻璃化冷冻的研究[A];中国实验动物学会第六届学术年会论文集[C];2004年

3 李劲松;韩之明;朱子玉;王敏康;廉莉;陈大元;;几种因素对电刺激诱导小鼠卵母细胞孤雌活化的影响[A];中国动物学会全国显微与亚显微形态科学分会第十次形态科学与显微注射技术学术研讨会论文摘要集[C];2000年

4 霍立军;范衡宇;钟志胜;陈大元;孙青原;;泛素蛋白水解酶复合体途径在小鼠卵母细胞减数分裂成熟、受精和早期胚胎卵裂中的作用[A];第九次全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2003年

5 李筱霜;卫恒习;李莉;张守全;;模拟微重力对小鼠卵母细胞减数分裂的影响[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集[C];2012年

6 陈秀芬;夏国良;谢辉蓉;陶勇;雷蕾;;促性腺激素诱导大、小鼠卵母细胞体外成熟的差异[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年

7 谢辉蓉;夏国良;陈秀芬;张美佳;付卓;王松波;;MAS参与调节体外培养的小鼠卵母细胞自发成熟[A];第九次全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2003年

8 金锐;白刚;包俊华;王莹;刘芳;;冷冻载体对小鼠卵母细胞玻璃化冷冻效果影响的研究[A];2011首届宁夏生殖医学学术年会资料汇编[C];2011年

9 韩斌;金锐;李灵武;王燕蓉;杨芳;于华;姚立岩;;1．0M、1．5M PROH两种浓度的小鼠卵母细胞慢冻-快融存活率比较[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年

10 朱子玉;文端成;韩之明;雷蕾;刘忠华;寇朝辉;王敏康;陈大元;;小鼠卵母细胞孤雌活化期间细胞骨架的作用[A];中国动物学会全国显微与亚显微形态科学（细胞及分子显微技术科学）分会第十一次学术研讨会论文摘要集[C];2002年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 吕鸿;不对称分裂相关分子在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的作用研究[D];山东大学;2010年

2 叶英辉;Leptin和GDNF对小鼠卵母细胞成熟的旁分泌调节机制[D];浙江大学;2008年

3 周萍;小鼠裸卵体外成熟系统建立及束缚应激对小鼠卵母细胞染色体倍性影响的研究[D];山东农业大学;2010年

4 张春晖;顺式高尔基体基质蛋白GM130影响小鼠卵母细胞纺缍体组装及不对称分裂的研究[D];南方医科大学;2011年

5 赵鸿梅;Cdc25B在小鼠卵母细胞成熟过程中调节机制的研究[D];中国医科大学;2007年

6 张清华;mSpindly在小鼠卵母细胞减数分裂进程中的定位与功能[D];山东师范大学;2010年

7 孟小倩;酪氨酸激酶Pyk2在大鼠和小鼠卵母细胞减数分裂过程中的定位和功能研究[D];山东师范大学;2007年

8 张阳;蛋白激酶A/Cdc25B通路在小鼠卵母细胞G_2期阻滞中作用的研究[D];中国医科大学;2005年

9 王慧利;小鼠卵母细胞染色质凝集的调控及咖啡因在山羊体细胞克隆中的应用[D];山东农业大学;2010年

10 陈倩;PKCδ/θ信号通路介导FSH诱导的小鼠卵母细胞减数分裂恢复的研究[D];中国农业大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 刘佰玲;p97在小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中作用的研究[D];郑州大学;2015年

2 陈秀芬;促性腺激素诱导大、小鼠卵母细胞体外成熟的差异[D];中国农业大学;2004年

3 兰国成;乙醇及6-DMAP对小鼠卵母细胞孤雌激活的研究[D];东北农业大学;2002年

4 牛蕾;小鼠卵母细胞和小鼠核移植胚胎中高尔基体的作用探索[D];第四军医大学;2005年

5 高凤兰;小剂量一氧化氮在小鼠卵母细胞成熟中的作用及分子机制的研究[D];南昌大学;2006年

6 王昭晖;牛和小鼠卵母细胞体外成熟培养[D];陕西师范大学;2010年

7 王子玉;次黄嘌呤对昆明白小鼠卵母细胞减数分裂调控作用的研究[D];山东农业大学;2004年

8 周林;Rbx1蛋白在小鼠卵母细胞中的功能研究[D];南京医科大学;2010年

9 谢颖颖;用于检测小鼠卵母细胞及早期胚胎中转录因子的免疫荧光法研究[D];四川农业大学;2008年

10 李芳;TNFα在小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟中的作用及其机制的研究[D];南昌大学;2007年

  本文关键词：p97在小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：251793