乙型肝炎病毒前S2蛋白激活人酰基蛋白硫酯酶1启动子的研究

发布时间：2017-03-16 13:03

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【摘要】：目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S2蛋白(preS2)对人酰基蛋白硫酯酶1(APT1)启动子的作用。方法:应用生物信息学方法确定人APT1启动子序列。PCR扩增人APT1启动子和HBV preS2基因,分别插入pGL3和pcDNA3.1(-)质粒构建人APT1启动子荧光素酶报告基因质粒p GL3-APT1和HBV preS2真核表达质粒pcDNA3.1(-)-preS2。将p GL3-APT1和pcDNA3.1(-)-preS2共转染人肝癌细胞系Hep G2,接着检测细胞荧光素酶活性,进而评估preS2对人APT1基因启动子的作用。数据用独立样本t检验分析。结果:测序结果证实pcDNA3.1(-)-preS2与pGL3-APT1与实验设计相符。pGL3-APT1的荧光素酶活性是阳性对照质粒pGL3-Control的荧光素酶活性的1.2倍(P0.01)。pcDNA3.1(-)-preS2与pGL3-APT1共转染Hep G2细胞的荧光素酶活性为无preS2基因质粒的pcDNA3.1(-)与pGL3-APT1共转染HepG2细胞荧光素酶活性的2.6倍(P0.01)。结论:本研究克隆的人APT1启动子序列具有高启动子活性;HBV preS2可激活人APT1启动子。
【关键词】：乙型肝炎病毒前S2蛋白 酰基蛋白硫酯酶1 启动子 反式激活
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R373.21
【目录】：

• 中文摘要4-5
• ABSTRACT5-7
• 英汉缩略词对照表7-9
• 前言9-11
• 1 材料与方法11-31
• 1.1 实验材料11-12
• 1.2 实验方法12-31
• 2 结果31-39
• 2.1 pcDNA3.1(-)-preS2重组质粒的构建31-33
• 2.2 APT1启动子双荧光素酶报告基因质粒的构建33-36
• 2.3 转染效率评价36-37
• 2.4 pGL3-APT1启动子活性检测37
• 2.5 HBV前S2蛋白与APT1基因的启动子的相互作用检测37-39
• 3 讨论39-40
• 4 结论40-41
• 参考文献41-44
• 综述44-51
• 参考文献48-51
• 攻读学位期间发表的学术论文目录51-52
• 致谢52

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本文编号：251794