Sema3A对小鼠骨髓来源的DC细胞表面分子B7-H3表达影响的实验研究

发布时间：2019-09-06 17:17

【摘要】：目的:研究信号素(Semaphrins)家族中Sema3A分子对小鼠骨髓来源的成熟和非成熟树突状细胞(DC,dendritic cell)表面分子B7-H3表达的影响。 方法:体外培养小鼠骨髓来源的成熟和非成熟DC并通过流式细胞术筛选DC。在第8天采用流式细胞直接免疫荧光标记法对所得细胞进行分选并检测CD11C、CD40、CD80、CD86、B7-H3的表达情况对DC细胞进行鉴定。把培养的成熟和非成熟DC分别分为空白对照组和干预组,干预组经不同浓度Sema-3A-Ab(1:500,1:1000,1:2000)干预72小时后,流式细胞仪分析干预后DC细胞表面共刺激分子B7-H3的表达并进行比较。 结果:用流式细胞仪检测所收集的细胞,CD11c+细胞达82.18%,第8天成熟DC空白对照组细胞上共刺激分子B7-H3阳性率为(7.22±0.44)%,第11天为(19.68±0.66)%,呈升高趋势。Sema-3A-Ab可抑制成熟DC细胞表面共刺激分子B7-H3的表达,干预组(10.15±0.91)%,对照组(19.68±0.66)%(p0.05)。Sema-3A-Ab对非成熟DC上细胞表面共刺激分子B7-H3的表达的影响不明显。 结论:随着时间的延长(第8天到第11天),B7-H3在成熟DC细胞表面的表达呈上升趋势。Sema-3A-Ab作用于成熟DC细胞引起其B7-H3表达下调,Sema3A能促进成熟DC表达B7-H3。Sema-3A-Ab的各浓度在其干预组之间无明显差异。
【图文】：

2、实验结果2.1 DC 细胞的鉴定CD11c 在 DC 细胞上特异性表达，所以 CD11c+的细胞即为 DC。用流式检测所收集的细胞，CD11c+细胞达 82.18%。（见图 1）应用荧光抗体标记流式细胞仪对两组 DC 表面标志物进行检测，mDC 表达粘附分子 CD40 和协激分子 CD80、CD86、B7-H3，分别为（13.92±0.27）％、（22.30±0.29）％±0.38）％、（7.22±0.44）％；imDC 分别为（9.95±0.19）％、（15.69％、（5.49±0.41）％、（4.71±0.58）％。（见图 2）

2.2 B7-H3 在小鼠 DC 上的表达采用流式细胞直接免疫荧光标记法，，用流式细胞仪对 2 组小鼠髓源性 DC 表面标志物 B7-H3 进行检测，结果显示：mDC 空白对照及各浓度干预组表达 B7-H3分别为：（19.68±0.66）％、（10.15±0.91）％、（10.26±0.60）％、（9.91±0.31）％（见图 3 和表 1）；imDC 空白对照及各浓度干预组表达 B7-H3 分别为：（12.92±0.77）％、（9.83±0.54）％、（10.75±0.89）％、（6.50±0.40）％（见图 3 和表 2）。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R392

【共引文献】

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本文编号：2532752