基底刚度对登革病毒2型感染人原代脐静脉内皮细胞影响的初步研究

发布时间：2017-03-18 19:05

  本文关键词：基底刚度对登革病毒2型感染人原代脐静脉内皮细胞影响的初步研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探讨细胞培养基底刚度对登革病毒感染人原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响。方法利用丙烯酰胺和双丙烯酰胺制备模拟正常人血管内皮细胞基底刚度的水凝胶(0±4Kpa),采用MTS法检测细胞的增殖,流式细胞仪检测不同基底刚度上HUVEC的细胞周期和凋亡率。常规方法鉴定增殖登革II型病毒(DENV-2),利用DENV-2(MOI=10)感染人原代脐静脉内皮细胞,透射电镜观察接毒组和正常对照组细胞超微结构的变化,证实登革病毒可以引起HUVEC的改变。再通过MTS法比较种植在塑料基底与水凝胶上的HUVEC经登革病毒感染后,细胞增殖率的变化,最后通过硝酸还原酶法检测两组细胞释放NO的水平以及双抗体夹心ELISA法检测ET-1的表达。结果1.采用自重弯曲法测得2%双丙烯酰胺和40%丙烯酰胺配比水凝胶的弹性模量为3030±0.44Pa。2.登革病毒能引起血管内皮细胞超微结构的改变。3.随着基底刚度的增加细胞增殖率显著增加,尽管不同基底上HUVEC的细胞周期与细胞凋亡率无明显差异,但经DENV-2感染后释放的NO和ET-1水平均较正常对照组有变化。结论1.基底刚度可影响人原代HUVEC的增殖效率,及释放的NO与ET-1浓度的变化。说明血管内皮受损后,其分泌合成的血管活性物质减少,一定程度上参与了登革热的致病发生。2.水凝胶模型的建立并没有影响细胞周期与细胞凋亡率的改变,提示该模型可为在体外研究登革病毒感染提供一定的新思路。
【关键词】：基底刚度 登革病毒 人原代脐静脉内皮细胞 增殖 细胞因子
【学位授予单位】：贵阳医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R373
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-8
• 略缩词表8-10
• 引言10-12
• 材料与方法12-26
• 结果26-35
• 讨论35-38
• 结论38-39
• 参考文献39-43
• 作者简历43-44
• 学位论文数据集44

【参考文献】

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1 余昶;张怡;刘肖珩;;流体剪切应力诱导内皮细胞迁移的力学-化学信号途径[J];航天医学与医学工程;2007年04期

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本文编号：254878