小鼠诱导多能性干细胞传代培养中染色体不稳定的研究

发布时间：2020-02-13 22:11

【摘要】：诱导多能性干细胞,具有广泛的应用前景,特别是在药物筛选,体外疾病模型和干细胞替代治疗方面给人们带来了无限的希望。但是,诱导多能性干细胞在真正应用于临床治疗前,其安全性是一个不得不考虑的问题。 诱导多能性干细胞的体外培养过程即是一个潜在的安全隐患。我们利用细胞遗传学手段从染色体水平上对传代培养过程中的小鼠诱导多能性干细胞的基因组稳定性进行检测。结果表明传代培养的小鼠诱导多能性干细胞中存在着染色体不稳定现象:传代培养中染色体数目异常细胞高比例出现;四因子Oct4、Sox2、Klf4和cMyc诱导的小鼠诱导多能性干细胞中含罗伯逊易位染色体细胞比例不断增加。并利用胞质阻断法对小鼠诱导多能性干细胞传代培养过程中染色体异常的产生和积累机制进一步研究。我们的结果证实小鼠诱导多能性干细胞在传代培养过程中染色体异常是不断产生的。染色体不分离的发生导致14号染色体数目异常细胞高比例出现;染色体易位的发生导致含14号染色体罗伯逊易位细胞比例不断增加。 我们的研究结果提示改善现有的诱导多能性干细胞的体外培养条件是十分必要的,这是诱导多能性干细胞安全应用于临床治疗的前提。
【图文】：

图 1.2 iPSCs 的多能性鉴定形态上，，iPSCs必须与ES细胞接近，而且具有无限增殖的能力。分子水平上，关键多能性因子的蛋白水平检测：如Oct4，Nanog；E异的表便抗原的检测：如小鼠中SSEA-1，人中的SSEA-3/4，TRa-1-60能性端粒酶表达的检测。逆转录病毒成膜相关基因表达的检测：如新生移酶和Trim28((Lei et al., 1996; Wolf and Goff, 2007)。 同时，真正的iPSC重编程因子发生沉默，不表达。而且，iPSCs的表观遗传谱也应与ES细，如多潜能性基因启动子区域的甲基化程度，雌性细胞中X染色体的aherali et al., 2007; Rideout et al., 2001)。功能上，iPSCs必须具有分化成三胚层的能力，包括体外分化实验，畸成实验和嵌合体动物实验以及四倍体补偿实验(Jaenischand Young, 2008).1.4 iPSCs 重编程分子机制Oct3/4， Sox2， Nanog和Klf4家族等转录因子网络的严格调控对维持

也有数目和结构异常同时出现的情况。有丝分裂过程出现异常，如细胞质不分裂，中心体异常扩增，DNA修复出错都可能导致异常染色体数目和结构的核型出现（图1.3）。另外，还有其他特异类型的染色体结构异常，如：双微体（DMs），多中心粒染色体，环状染色体等。
【学位授予单位】：中国科学技术大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R329

【共引文献】

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本文编号：2579267