ApoM对TNF-α刺激的内皮细胞粘附分子表达的影响

发布时间：2020-03-21 03:11

【摘要】：目的:探索内皮细胞株(EA.hy926细胞)中载脂蛋白M与1磷酸鞘氨醇(S1P)以及PKCδ对炎症因子(ICAM-1)表达的影响。方法:(1)构建Apo M慢病毒载体转染EAhy926细胞,分为Apo M过表达组(Apo M-OE)和Apo M阴性对照组(NC)。将NC细胞分为空白处理组和TNF-α处理组,Apo M过表达细胞分为空白处理组和TNF-α处理组,TNFα处理四小时,PCR检测炎症因子ICAM-1 m RNA表达水平。(2)将NC细胞分为空白处理组和S1P处理组,Apo M过表达细胞分为空白处理组和S1P处理组,S1P处理3小时,PCR检测炎症因子ICAM-1 m RNA表达水平。(3)将NC细胞分为TNF-α处理组和S1P+TNF-α处理组,Apo M过表达细胞分为TNF-α组和S1P+TNF-α处理组,PCR检测炎症因子ICAM-1 m RNA表达水平。(4)将NC细胞分为TNF-α组和Rotterin+TNF-α处理组,Apo M过表达细胞分为TNF-α组和Rotterin+TNF-α处理组,PCR检测炎症因子ICAM-1 m RNA表达水平。结果:(1)PCR结果显示,Apo M-OE组Apo M m RNA表达水平显著高于NC组(2)TNF-α处理组ICAM-1 m RNA的表达水平较对照组显著升高;过表达Apo M后,TNF-α处理组ICAM-1 m RNA的水平较对照组显著升高;NC细胞中TNF-α处理组ICAM-1 m RNA的表达较Apo M-OE细胞TNF-α处理组显著升高,表明在EAhy926细胞中,过表达Apo M可抑制TNF-α介导的ICAM-1的升高;双因素交互作用分析提示,TNF-α与Apo M对ICAM-1表达的影响具有交互作用。(3)NC细胞中空白处理组与Apo M过表达空白处理组的ICAM-1无显著差异;Apo M-OE细胞在S1P处理组ICAM-1m RNA的表达水平显著低于NC组中空白对照组,表明在无TNF-α介导炎症情况下,Apo M过表达与S1P同时存在时,可显著下调ICAM-1表达;双因素交互作用分析结果提示,Apo M与S1P在影响ICAM-1表达中无交互作用。(4)NC细胞TNF-α处理组与NC细胞TNF-α+S1P组ICAM-1 m RNA无显著差异;Apo M过表达组中,TNF-α处理组与TNF-α+S1P组ICAM-1 m RNA无显著差异,表明S1P单独存在不能显著抑制ICAM-1的表达。(5)所有组都用TNF-α预处理。NC细胞中,空白对照组ICAM-1 m RNA显著低于Rottlerin处理组,表明Rotterin抑制PKCδ活性后TNF-α诱导ICAM-1表达的效应显著增加;Apo M过表达细胞Rottlerin处理组ICAM-1m RNA显著低于NC细胞Rottlerin组,表明Apo M可显著抑制由Rotterin介导的ICAM-1的表达。结论:TNF-α可诱导内皮细胞株EA.hy926中ICAM-1表达的升高;无TNF-α诱导炎症反应下,Apo M联合S1P存在下可显著抑制ICAM-1的表达。有TNF-α介导的炎症状态下,Apo M联合S1P不能降低ICAM-1的表达;在TNF-α介导的炎症状态下,Rotterin能够增强TNF-α介导的ICAM-1表达效应;过表达Apo M可以抑制由Rotterin介导的ICAM-1表达的增加。综上所述,在内皮细胞株EA.hy926中Apo M可抑制由Rotterin介导的ICAM-1表达,从而发挥抗炎作用。
【图文】：

图 1 EA.hy926 细胞 ApoM 慢病毒感染效率oM能够抑制炎症因子TNF-α介导的炎症因子ICAM-1的升示，在 NC 细胞中，TNF- 处理组 ICAM-1 mRNA 的表，差异具有统计学意义（P<0.0001），表明 TNF- 可以高。NC 细胞 TNF- 组 ICAM-1 mRNA 是 ApoM-OE 细统计具有显著差异（P<0.001），表明 EA.hy926 细胞中， 介导的炎症因子 ICAM-1 的升高。示，双因素交互作用分析提示，TNF-α 与 ApoM 在影响 。

图 2 TNF-α 和 ApoM 过表达对 ICAM-1 表达的影响图 3 TNF-α 和 ApoM 过表达对 ICAM-1 表达的影响的交互作用F-α介导的状态下，S1P能够联合ApoM抑制炎症因子因子ICAM-1 4 所示，NC 细胞空白处理组是 ApoM-OE 空白处理组的 1.41 倍，，
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R364.5

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本文编号：2592647