广西巴马居民SIRT6、FOXO3A基因甲基化水平研究

发布时间：2017-03-21 20:09

  本文关键词：广西巴马居民SIRT6、FOXO3A基因甲基化水平研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:了解广西巴马SIRT6、FOXO3A基因启动子区甲基化水平,结合前期基因m RNA、蛋白表达的结果,探讨这两个基因甲基化水平与巴马长寿现象的关系,一步探索巴马长寿机制提供理论依据。方法:2011年5月在广西巴马瑶族自治县现场收集样本,依据长寿家族史的定义,将收集到的具有长寿家族史的健康居民129例设寿家族史组,根据是否是长寿老人进一步分寿组(42例)和后代组(87例);无长寿家族史的健康居民86例设汉无长寿家族史组。采集研究人群外周血样,提取基因组DNA,应用焦磷酸测序方法检测SIRT6、FOXO3A基因的启动子区甲基化水平。结合课题组前期研究的m RNA、蛋白表达结果,采用卡方检验比较研究对象基本资料,秩和检验比较各组基因的甲基化水平,t检验、卡方检验比较各组m RNA、蛋白表达水平,logistic回归分析甲基化水平与长寿的关系,spearman相关分析甲基化率与年龄、m RNA和蛋白表达的关系,多重线性回归分析甲基化率与吸烟、饮酒的关系。结果:1、研究对象基本资料:研究对象共215人,长寿家族史组129人,非长寿家族史组86人。两组研究人群性别间差异无统计学意义(P0.05),年龄间差异有统计学意义(P0.05),长寿家族史组比无长寿家族史组高。长寿家族史组和无长寿家族史组的吸烟比例分别汉24.0%和27.9%,差异无统计学意义(P0.05);长寿家族史组和无长寿家族史组的饮酒比例分别汉69.0%和65.1%,差异无统计学意义(P0.05)。2、甲基化水平及m RNA、蛋白水平的比较:长寿家族史组和无长寿家族史组SIRT6基因各Cp G位点甲基化水平的组间比较,p2和p5两个位点差异具有统计学意义(P0.05),长寿家族史组比无长寿家族史组低;长寿家族史组m RNA表达比无长寿家族史组高(P0.05);蛋白间比较差异无统计学意义(P0.05)。长寿家族史组分寿组和后代组后,p2和p5三组间差异具有统计学意义(P0.05),长寿组和后代组p2位点甲基化水平均比无长寿家族史组低,后代组p5位点甲基化水平比无长寿家族史组低,其他位点组间比较差异均无统计学意义(P0.05);后代组m RNA表达比长寿组和无长寿家族史组高;蛋白表达由高到低则是长寿组、无长寿家族史组和后代组。FOXO3A基因各Cp G位点甲基化水平在长寿家族史组和无长寿家族史组间的比较显示,p3和p5位点间差异有统计学意义(P0.05),其中长寿家族史组在p3位点中的甲基化水平比无长寿家族史组低,在p5位点中比无长寿家族史组高;长寿家族史组m RNA表达比无长寿家族史组高(P0.05);蛋白表达无统计学差异(P0.05)。长寿家族史组分寿组和后代组后p3、p4和p5位点间甲基化水平差异有统计学意义(P0.05),后代组在p3、p4位点甲基化水平比无长寿家族史组低,长寿组p5位点的甲基化水平则比无长寿家族史高;后代组m RNA表达水平比长寿组和无长寿家族史组高;蛋白水平由高到低是长寿组、无长寿家族史组和后代组。3、各甲基化位点的logistic回归分析:经Logistic回归分析,调整性别、年龄、吸烟和饮酒等因素的影响后,SIRT6基因各Cp G位点对长寿影响的结果显示,p2和p5位点是长寿的保护因素,p2、p5的OR值和95%CI分别是0.411(0.218~0.775)、0.834(0.708~0.983)。FOXO3A基因的p3显示是长寿的保护因素,其具体OR值和95%CI是0.808(0.699~0.934),其他位点无显示与长寿有关(P0.05)。4、基因位点与m RNA、蛋白表达的相关性:结合前期研究的m RNA、蛋白表达的数据,p2、p5和pm与m RNA表达负相关(P0.05),p4、p5及pm与蛋白表达正相关(P0.05)。p1、p2、p4和pm与m RNA表达负相关(P0.05),p4和pm与蛋白表达正相关。5、SIRT6、FOXO3A基因甲基化水平与吸烟、饮酒的关系:SIRT6基因p3位点与吸烟有关(P0.05),其他位点与吸烟、饮酒均无关(P0.05)。FOXO3A基因所有位点甲基化水平与吸烟、饮酒均无关(P0.05)。结论:1、SIRT6、FOXO3A基因启动区部分位点甲基化水平可能与广西巴马长寿现象有关,其低甲基化水平可能是巴马长寿的有利因素。2、广西巴马SIRT6、FOXO3A基因不同的Cp G位点甲基化水平与年龄的相关性不同,部分位点与m RNA表达水平负相关,与蛋白表达水平正相关。3、广西巴马SIRT6、FOXO3A基因甲基化水平受吸烟、饮酒影响不大。
【关键词】：巴马 长寿 SIRT6 FOXO3A 甲基化
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R394
【目录】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 前言12-16
• 1 料与方法16-25
• 1.1 研究对象及分组16
• 1.2 主要仪器与试剂16-17
• 1.3 实验方法17-25
• 1.4 实验质量控制25
• 1.5 统计分析方法25
• 2 结果25-42
• 2.1 研究人群基本资料25-26
• 2.2 SIRT6、FOXO3A基因启动子区域的生物信息学分析结果26-31
• 2.3 基因甲基化测序结果31-34
• 2.4 SIRT6、FOXO3A基因甲基化水平的比较34-39
• 2.5 基因甲基化位点的logistic回归分析39-40
• 2.6 甲基化水平与年龄、m RNA、蛋白表达的相关性40-41
• 2.7 基因甲基化水平与吸烟、饮酒的关系41-42
• 3 讨论42-49
• 3.1 基因甲基化水平与长寿的关系43-45
• 3.2 甲基化水平与年龄的关系45-46
• 3.3 甲基化水平与m RNA、蛋白表达的关系46-48
• 3.4 甲基化水平与吸烟、饮酒的关系48-49
• 4 总结49-50
• 参考文献50-59
• 综述59-71
• 参考文献66-71
• 致谢71-72
• 攻读学位期间发表的学术论文72-73
• 附件73-76

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