TRPV1介导温灸对AA模型小鼠抗炎效应的作用研究

发布时间：2017-03-23 01:18

  本文关键词：TRPV1介导温灸对AA模型小鼠抗炎效应的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景：炎症是机体受到外界微生物侵害或损伤时,产生的一种局部的、保护性的生理反应。炎症反应的强度是决定了不同疾病的发生：反应不足导致免疫缺陷,会引起感染和癌症；反应过度则会引发类风湿性关节炎、克罗恩氏病、动脉粥样硬化、糖尿病、阿尔茨默氏病等疾病。因此炎症反应被认为是大多数重要疾病的共同通路。大量的艾灸临床研究已经表明艾灸依靠其温热刺激发挥抗炎效应。瞬时受体电位香草酸亚型1(Transient Receptor Potential Vanilloid Subtype 1, TRPV1)受体是非选择性阳离子通道,研究发现TRPV1在炎症发展过程中起着重要的作用,应用TRPV1激动剂具有抗炎的作用。TRPV1作为温度感受器,当温度高于43℃的时候TRPV1就会被激活,大于43℃的热刺激处于临床上艾灸施灸局部皮肤温度的范围中,与TRPV1激活的温度阈值相当。目的：探讨TRPV1在温灸对佐剂型关节炎(Adjuvant Arthritis, AA)模型小鼠抗炎效应的作用。方法：实验一：30只KM小鼠随机分为空白组、模型组、温灸组各10只,除空白组外,在每只小鼠右后足跖皮内注射完全弗氏佐剂20μL建立佐剂型关节炎模型。从造模成功当天开始,温灸组以5mm*200mm的特制艾条在脊柱L5、L6区域悬灸20分钟,保持艾条距离皮肤12±2mm,使温度维持在44±1℃。每天1次,总共7天。期间空白组、模型组均不作任何处理。测量并记录实验第1天、实验第2天、实验第4天、实验第6天、实验第8天各组的右后足跖容积。所有治疗结束后取材,ELISA方法检测血清IL-1β、TNF-α含量。实验二：60只KM小鼠随机分为空白组、模型组、辣椒素组、辣椒平组、温灸组和温灸±辣椒平组(以下简称温平组)各10只,除空白组外,在每只小鼠右后足跖皮内注射完全弗氏佐剂20μL建立佐剂型关节炎模型。从造模成功当天开始,辣椒素组每只小鼠在脊柱L5、L6区域皮下注射辣椒素0.1ml/10g。辣椒平组每只小鼠腹腔注射辣椒平0.1ml/10g。温平组每只小鼠先腹腔注射辣椒平0.1ml/10g,15分钟后再以特制艾条在脊柱L5、L6区域悬灸20分钟,保持艾条距离皮肤12±2mm,使温度维持在44±1℃。每天1次,总共7天。空白组、模型组、温灸组处理同实验一。检测指标和方法同实验一。实验三：16只野生型C57BL/6小鼠随机分为WT模型组和WT温灸组各8只；14只TRPV1基因敲除小鼠随机分为KO模型组和KO温灸组各7只。在每只小鼠右后足跖皮内注射完全弗氏佐剂20μL建立佐剂型关节炎模型。从造模成功当天开始,WT温灸组和KO温灸组以5mm*200mm的特制艾条在脊柱L5、L6区域悬灸20分钟,保持艾条距离皮肤12±2mm,使温度维持在44±1℃。每天1次,总共7天。期间WT模型组和KO模型组均不作任何处理。检测指标和方法同实验一。结果：1.与空白组比较,模型组的足跖肿胀度显著升高(P0.01),表明佐剂型关节炎模型造模成功。2.与模型组比较,辣椒素组、辣椒平组和温灸组对足跖肿胀度、血清IL-1β、TNF-α的含量均有明显降低的作用(P0.01),表明三者均有抑制炎症的作用。3与温灸组比较,加入辣椒平的预处理后,温平组的足跖肿胀度、血清IL-1β、TNF-α的含量高于温灸组(P0.05),这表明辣椒平可能部分拮抗温灸抑制炎症的效应。4.与WT模型组比较,WT温灸组的足跖肿胀度、血清IL-1β、TNF-α的含量均明显下降(P0.01)；与KO模型组比较,KO温灸组的足跖肿胀度、血清IL-1β、TNF-α的含量均无明显下降(P0.05)。结论：TRPV1在温灸抑制炎症过程中发挥重要作用,缺少TRPV1的介导,温灸可能失去抗炎效应。
【关键词】：TRPV1 温灸 炎症
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R245;R-332
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 前言12-14
• 1.1 艾灸以温热刺激为主要作用因素,与TRPV1激活的温度阈值相当12
• 1.2 抑制炎症是艾灸治疗的主要效应12-13
• 1.3 TRPV1——抗炎的重要靶点13
• 1.4 研究目的13-14
• 实验研究TRPV1在温灸对AA模型小鼠抗炎效应的作用研究14-25
• 实验1 温灸对从小鼠的作用研究14-18
• 1.1 材料与方法14-15
• 1.1.1 动物选择14
• 1.1.2 主要试剂与器材14
• 1.1.3 分组及处理14-15
• 1.1.4 指标采集及测定方法15
• 1.1.5 数据分析15
• 1.2 结果与分析15-18
• 1.2.1 温灸对AA小鼠足跖肿胀度的影响15-16
• 1.2.2 温灸对从小鼠相关炎症指标的影响16-18
• 实验2 辣椒平预处理后温灸对从小鼠的作用研究18-22
• 2.1 材料与方法18-19
• 2.1.1 动物选择18
• 2.1.2 主要试剂与器材18
• 2.1.3 分组及处理18-19
• 2.1.4 指标采集及测定方法19
• 2.1.5 数据分析19
• 2.2 结果与分析19-22
• 2.2.1 辣椒平预处理后温灸对AA小鼠足跖肿胀度的影响19-20
• 2.2.2 辣椒平预处理后温灸对从小鼠相关炎症指标的影响20-22
• 实验3 温灸对TRPV1基因敲除从小鼠的作用研究22-25
• 3.1 材料与方法22-23
• 3.1.1 动物选择22
• 3.1.2 主要试剂与器材22
• 3.1.3 分组及处理22
• 3.1.4 指标采集及测定方法22-23
• 3.1.5 数据分析23
• 3.2 结果与分析23-25
• 3.2.1 温灸对TRPV1基因敲除从小鼠足跖肿胀度的影响23
• 3.2.2 温灸对TRPV1基因敲除从小鼠相关炎症指标的影响23-25
• 讨论25-29
• 3.1 本研究实验动物模型选取25
• 3.2 温灸部位选取依据25
• 3.3 温灸发挥抗炎作用由TRPV1介导25-27
• 3.3.1 检测指标与炎症的关系25
• 3.3.2 温灸具有抗炎作用25-26
• 3.3.3 TRPV1参与温灸的抗炎过程26
• 3.3.4 温灸的抗炎效应由TRPV1介导26-27
• 3.4 温灸与TRPV1药理性激动剂和拮抗剂的关系27
• 3.4.1 TRPV1药理性激动剂和拮抗剂均有抗炎的作用27
• 3.4.2 温灸的作用方式27
• 3.4.3 温灸的安全性27
• 3.5 小结27-28
• 3.6 不足与展望28-29
• 参考文献29-32
• 附录32-33
• 致谢33

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 嵇明月;王玲玲;姜劲峰;周小云;马明云;;温和灸对高脂血症大鼠氧化应激及炎症反应的影响[J];中华中医药杂志;2013年08期

2 张玉翠;于隽;孟庆玲;李江山;;电针不同神经节段穴位对大鼠胃运动异常模型胃内压的影响[J];湖南中医药大学学报;2011年11期

3 张文华;江剑平;;白介素-1β在炎性痛中的作用及其机制[J];生命科学;2010年03期

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本文编号：262644