内质网应激在雌激素减轻失血性休克大鼠肠损伤中的作用

发布时间：2020-05-31 05:20

【摘要】：肠道是失血性休克后最早发生缺血的器官之一,对缺血缺氧较为敏感,故肠屏障功能较易受损。由于肠道是人体最大的细菌库,肠屏障功能受损极易引起肠源性细菌/内毒素移位和炎性介质进入循环,发生“二次打击”,最终引起远隔器官损伤。因此,改善休克后的肠损伤在救治休克过程中起着关键作用。雌激素(E2)可减轻失血性休克后的肠损伤,但是E2是通过哪个雌激素受体(ER)或者是多个受体共同作用来减轻肠损伤,仍需进一步研究。内质网应激(ERS)在缺血再灌注引起的细胞凋亡中起着关键的作用,ERS在失血性休克后肠损伤的发生过程中发挥什么样的作用?E2减轻失血性休克肠损伤的作用机制是否与抑制ERS有关?尚需进一步研究。为此,本研究建立大鼠失血性休克模型,探讨E2减轻失血性休克肠损伤的作用及其与ERS的关系,以期揭示E2干预休克后肠损伤的机制,为临床治疗失血性休克提供实验依据。首先,本研究建立失大鼠血性休克模型。即:将大鼠放入小动物麻醉机的麻醉盒中吸入3%VOL异氟烷诱导麻醉后,肌肉注射1%戊巴比妥钠溶液(50 mg/kg)行全身麻醉,将大鼠仰卧位固定于小动物手术台上,按照我室常规方法复制失血性休克模型(40 mm Hg维持1.5 h,随后行液体复苏)。首先应用16只健康雄性大鼠验证了E2治疗对失血性休克大鼠存活时间与存活率的作用。结果显示,E2治疗延长了休克大鼠的存活时间,提高了存活率。随后,采用随机分组的方法,将144只大鼠随机分为24个组(n=6),应用E2、ER激动剂(PPT、DPN、G1)与抑制剂(ICI、G15)、ERS抑制剂(4-PBA)与增强剂(XCT790)在液体复苏的同时,实施不同的干预措施,具体分组如下:假手术组(sham)、Sham+E2、Sham+PPT、Sham+DPN、Sham+G1、Sham+E2+ICI、Sham+E2+G15、Sham+E2+XCT790、Sham+PPT+XCT790、Sham+DPN+XCT790、Sham+G1+XCT790、Sham+4-PBA、Shock、Shock+E2、Shock+PPT、Shock+DPN、Shock+G1、Shock+E2+ICI、Shock+E2+G15、Shock+E2+XCT790、Shock+PPT+XCT790、Shock+DPN+XCT790、Shock+G1+XCT790以及Shock+4-PBA组。液体复苏结束后3h或相应时间点,采集动物动脉血标本,检测肠损伤指标D-乳酸(D-LA)、肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP);留取肠组织,部分用于制备组织切片,观察肠组织形态学变化;部分用于湿/干比(W/D)测定;部分用于通透性测定。结果发现,失血性休克引起了肠损伤与通透性增高,表现在:W/D、血浆I-FABP和D-LA水平均显著升高;E2及其受体激动剂PPT、PDN、G1治疗显著降低了失血性休克大鼠肠组织的W/D、血浆I-FABP和D-LA水平;E2受体抑制剂ICI废除了E2降低失血性休克大鼠肠组织W/D、血浆I-FABP和D-LA水平的作用;ERS抑制剂4-PBA治疗显著降低了失血性休克大鼠的肠组织W/D、血浆I-FABP和D-LA水平;ERS增强剂XCT790显著抑制了E2及其受体减轻失血性大鼠肠损伤的作用。上述研究结果表明,E2能够有效改善失血性休克大鼠的存活状态,且E2通过ER发挥了减轻失血性休克大鼠肠组织损伤的作用,其机制与抑制ERS有关。
【学位授予单位】：河北北方学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R459.7;R-332

【参考文献】