“三法三穴”推拿干预对坐骨神经损伤模型大鼠冷超敏反应的影响

发布时间：2020-05-31 20:50

【摘要】：[目的]通过检测SNI模型大鼠脊髓背角中Cdh8蛋白,背根神经节中TRPA1、TRPM8、Cdh8、PAR2蛋白及皮肤上皮细胞TRPA1蛋白表达的变化,探讨“三法三穴”推拿干预对周围神经损伤模型大鼠冷感觉超敏反应的影响。[方法]通过建立坐骨神经损伤大鼠模型,并对其进行“三法三穴”推拿干预,运用免疫组织化学、WesternBlot技术,对大鼠脊髓背角中Cdh8、背根神经节中TRPA1、TRPM8、Cdh8、PAR2以及足部皮肤的上皮细胞中TRPA1进行定性、定量研究。从脊髓背角神经元中Cdh8蛋白、背根节神经元细胞中TRPA1、TRPM8、Cdh8、PAR2蛋白及皮肤上皮细胞TRPA1蛋白表达的层面,结合冷板实验评价坐骨神经损伤模型大鼠冷感觉超敏性,探究“三法三穴”推拿干预对SNI大鼠模型中冷超敏反应的影响。[结果]1.冷板实验结果造模前1天各组大鼠患侧后足在冷板上的抬足次数无明显不同(P0.05);推拿干预0次后,正常组与假手术组大鼠患侧后足抬足次数比较无明显不同(P0.05);与假手术组比较,模型组和推拿干预组大鼠患侧后足抬足次数明显增多(P0.01)。推拿干预20次后,与模型组比较,推拿干预组大鼠患侧后足在冷板上的抬足次数明显减少(P0.01)。2.脊髓背角神经元Cdh8的表达结果免疫组化法与WesternBlot法检测脊髓背角神经元中Cdh8蛋白表达结果显示,推拿干预0天后,正常组与假手术组之间脊髓背角Cdh8的表达无明显不同(P0.05);与假手术组比较,模型组脊髓背角Cdh8的表达明显增多(P0.05)。推拿干预20天后,与模型组比较,推拿干预组脊髓背角Cdh8的表达有所减少,但变化不显著。3.背根神经节神经元中TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8的表达结果免疫组化法与Western Blot法检测背根节神经元中TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8蛋白表达结果显示,推拿干预0天,正常组与假手术组之间背根神经节中TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8的表达无明显不同(P0.05);模型组与假手术组比较,背根神经节中的TRPA1、TRPM8、PAR2、Cdh8表达均显著增多(P0.05)。推拿干预20天后,与模型组比较,推拿干预组背根神经节TRPA1、PAR2的表达均减少(P0.05),而Cdh8、TRPM8蛋白减少不显著。4.皮肤上皮细胞TRPA1的表达结果免疫组化法检测皮肤上皮细胞TRPA1的表达结果显示,推拿干预0天后正常组与假手术组之间皮肤上皮细胞TRPA1的表达无明显不同(P0.05);与假手术组比较,模型组和推拿干预组皮肤上皮细胞TRPA1蛋白表达均增多(P0.05)。推拿干预20天后,推拿干预组与模型组比较,皮肤上皮细胞TRPA1表达明显减少(P0.05)。WesternBlot未检测出结果。[结论]1.“三法三穴”推拿干预可显著改善SNI模型大鼠的冷感觉超敏反应。2.“三法三穴”推拿干预对SNI模型大鼠的冷感觉超敏反应的恢复机制与调节TRPA1冷感受器通路中相关蛋白有关。3.“三法三穴”推拿干预通过抑制背根神经节中TRPA1、PAR2及皮肤上皮细胞中TRPA1蛋白的表达起到促进冷感觉超敏反应恢复的作用。
【图文】：

造模前１天各组大鼠抬足次数无明显的不同（Ｐ＞０．０５）；造模后７天（推拿干预０逡逑天），正常组与假手术组之间抬足次数无明显差异（Ｐ＞０．０５）；与假手术组比较，模型逡逑组和推拿干预组大鼠抬足次数明显增多，，差异具有统计学意义（ＰＣ０．０１）。推拿干预２０逡逑天后，与模型组比较，推拿干预组抬足次数显著减少，且差异具有统计学意义（ＰＣ０．０１邋），逡逑说明“三法三穴”推拿干预能有效改善坐骨神经损伤大鼠在冷板上的冷感觉超敏反应的逡逑次数。（见表１０、图１）。逡逑逦表１０大鼠右侧冷板实验测定结果茂赵）（单位：次）逦逡逑组别逦样本量逦冷板抬足次数逡逑逦Ｎ逦基线逦干预０天逦干预２０天逦＿逡逑正常组逦８逦６．６０＋３．５０逦７．６０±２．８０逦１０．６０±２．７０逡逑假手术组逦８逦８．１０邋土邋４．１０逦８．００±２．００逦９．１０±３．８０逡逑模型组逦８逦７．３０邋＋邋５．００逦３０．００±４．８０ａ邋２１．１０±５．１０ａ逡逑推拿组逦８逦６．９０±３＿５０逦３１．００±２．９０ａ逦１２．００土邋４．１０＊逡逑注：Ａ表示与假手术组比较／＊＜０．０５；邋４表示与模型组比较＿Ｐ＜0．0ｌ。逡逑■正栤逡逑

逦“三法三穴”推拿干预对坐骨神经损伤模型大鼠冷超敏反应的影响逦逡逑免疫组化法与Ｗｅｓｔｅｒｎ邋Ｂｌｏｔ法检测脊髓背角ｃｄｈ８光密度值和蛋白表达结果显不：与逡逑假手术组比较，模型组脊髓背角Ｃｄｈ８的表达明显增多（Ｐ＜0．0５）。推拿干预２０天后，逡逑推拿干预组与模型组比较，推拿干预组大鼠脊髓背角中Ｃｄｈ８的表达稍有所减少，但差逡逑异不显著（见表１１、１２、图２、３、４）。逡逑逦表１１大鼠脊髓背角Ｃｄｈ８光密度值测量结果逦逡逑组别逦样品量逦逦平均值土标准差逦逡逑Ｎ逦干预０天逦干预２０天逡逑正常组逦８逦０．１４±０．０１逦０．１４±０．００逡逑假手术组逦８逦０．１４士邋０．０１逦０．１４±０．００逡逑模型组逦８逦０．２１±０．０３ａ逦０．２１±0．0３ａ逡逑推拿组逦８逦０．２２±０．Ｑ２ａ逦０．２０±０．０３ａ逡逑注：＆表示与假手术组比较尸＜0．0５。逡逑四正常组逡逑
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R244.1;R-332

【参考文献】

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本文编号：2690440