“肾脑相济”电针疗法对围绝经期抑郁症模型大鼠海马及其内环境的影响

发布时间：2020-06-11 07:37

【摘要】：目的:目的:以“肾脑相济”理论为指导,观察电针疗法对围绝经期抑郁症模型大鼠行为学改变、大鼠海马内环境中GR、MR水平变化以及海马CA3区神经细胞、核仁变化情况,探索寻求电针疗法对围绝经期抑郁症的作用机制,为临床针灸治疗本病提供相应的理论支持与依据。材料与方法:1.动物及分组选用SPF级雌性SD大鼠,所有动物进入实验室后进行3w适应性饲养。实验过程中对动物的处置符合《关于善待实验动物的指导性意见》的规定。用随机数字表法将40只大鼠随机分为4组:空白组、模型组、西药组、电针组每组10只。2.造模方法选择去势(OVX)联合慢性不可预见性刺激(CUMS)建立围绝经期抑郁症大鼠模型。具体方法:除去空白组其余各组大鼠先经水合氯醛腹腔注射麻醉,行双侧卵巢切除术。之后进行抑郁症模型复制,采用改良P.Willner传统慢性不可预见性刺激造模方法进行抑郁症模型复制。干预措施空白组大鼠正常饲养,不接受刺激。模型组大鼠进行抓取并用布袋包覆固定20min。西药组大鼠使用盐酸氯米帕明片灌胃治疗,将药片用研钵研碎后溶于0.9%生理盐水中,按20mg/kg·d-1用量灌胃,连续28d。电针组大鼠用布袋包覆固定大鼠行针刺后加电针,针刺穴位定位参照《实验针灸学》,针刺双侧“肾俞”(位于大鼠背部,第二腰椎下旁开5mm之两旁肋间,直刺6mm),双侧“三阴交”(后肢内踝尖直上10mm,直刺5mm),头顶“百会”(顶骨正中,平刺2mm);两对电极接大鼠同侧三阴交及肾俞,第三对电极接鼠尾和百会,电极(负载250Ω)0~18V,疏密波型,疏波4Hz,密波20Hz,强度以局部皮肤肌肉轻微颤动为度,留针20min,每日1次,连续28d。3.指标检测治疗后,观察大鼠一般情况、动情周期,分别在造模前、造模后、治疗后对大鼠进行行为学检测,包括旷场实验、糖水实验、强迫游泳实验、悬尾实验;尼氏染色条件下观察,测定海马CA3区神经细胞数目及核仁数目、总面积、积分光密度及平均黑度;酶联免疫吸附法(ELISA)测定海马内环境中糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)水平。结果:1.行为学检测1.1旷场实验结果显示:治疗后模型组与空白组比较P0.05,西药组与模型组相比P0.05,电针组与模型组比较P0.05,电针治疗后大鼠180s中央格停留时间和运动距离都有所增加,结果近似西药组。1.2糖水实验结果显示:治疗后模型组与空白组比较P0.05,西药组与模型组比较P0.05,电针组与模型组比较P0.05有统计学意义,电针治疗后大鼠糖水偏嗜率有所增加,结果近似西药组。1.3强迫游泳实验结果显示:治疗后模型组与空白组比较P0.05,西药组与模型组比较P0.05,电针组与模型组比较P0.05有统计学意义,电针治疗后大鼠强迫游泳180s不动时间减少,结果近似西药组。1.4悬尾实验结果显示:治疗后模型组与空白组比较P0.05,西药组与模型组比较P0.05,电针组与模型组比较P0.05有统计学意义,电针后大鼠悬尾不动时间减少,结果与西药组相似。2.形态学指标观察检测海马CA3区尼氏染色:神经细胞数量及胞内核仁在数量、面积、积分光密度、平均黑度方面均显示治疗后模型组与空白组比较P0.05,西药组与模型组比较P0.05,电针组与模型组比较P0.05有统计学意义,电针治疗后神经细胞活性有所提高,与西药组结果相似。3.分子生物学指标检测海马区ELISA测定海马内环境中糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)含量:结果显示治疗后模型组与空白组比较P0.05,西药组与模型组比较P0.05,电针组与模型组比较P0.05有统计学意义,电针治疗后结果与西药组相似。结论:1.电针治疗与氯米帕明干预均能有效改善模型大鼠行为学指标,说明电针对围绝经期抑郁症模型大鼠的治疗作用可以通过大鼠行为学变化来体现。2.电针“百会”、“肾俞”和“三阴交”穴能够增加海马CA3区神经元细胞数量,提高其功能活性,其对围绝经期抑郁症模型大鼠的改善作用可能与电针疗法对海马内环境的良性调整作用有关。3.本研究认为,围绝经期抑郁症模型大鼠的基本病机在于肾虚所致的脑神失养,“肾脑相济”电针疗法的“补肾益脑,安神解郁”治则通过对海马内环境稳态激素水平的调节来体现。
【图文】：

1 一般情况观察围绝经期抑郁症造模结束后，除了空白组大鼠以外，其他组大鼠反应迟缓、对外界事物淡漠、普遍表现为食欲下降、活动度减少、皮毛缺乏光泽、倦怠嗜睡、便质稀溏。治疗后，西药组、电针组上述一般情况明显改善；模型组一般情况略有好转，但相比于空白组、西药组和电针组仍较差。2 动情周期检测图 1a 可见，空白组在显微镜下放大 200 倍观察，动情前期大部分为有核上皮细胞，偶有白细胞和角化细胞，有动情周期；动情中期全部是角化上皮细胞间或有少量上皮细胞；动情后期三者均有。图 1b 可见，模型组在显微镜下放大 200 倍观察，有大量白细胞及少量有核退化上皮细胞和黏液，说明模型大鼠动情周期不规则，证明去势模型造模成功，，大鼠围绝经期模型复制成功。

图 1b 模型组3 电针干预对围绝经期抑郁症大鼠行为学指标的影响在造模前，造模后及治疗后三个时间点对实验动物进行旷场实验、糖水偏嗜实验及强迫游泳实验。3.1 旷场实验表 3、图 2 可见：实验动物 180s 内中央格停留时间及运动距离在造模前各组没有比较意义 (P＞0.05)，而 CUMS 造模后除空白组外其他组中央格停留时间降低（P＜0.05），有统计学意义；给予不同疗法治疗后，治疗组动物在中央格停留时间与模型组相比变长（P＜0.05），有统计学意义。表 3 各组旷场实验 3 分钟中央格停留时间实验数据（ ±S,s）组 别 n(只) 造模前 造模后 治疗后
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R245.97;R-332

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本文编号：2707589