IL-22调节人肺泡上皮细胞系A549细胞表达HBD-2的分子机制研究

发布时间：2020-06-19 19:42

【摘要】：【目的】 Th17细胞因子可诱导气道内HBD-2高表达而发挥广谱抗菌活性。本研究探讨IL-22能否调节肺泡II型上皮细胞系A549表达HBD-2及其相关的信号通路。 【方法】1.流式细胞技术(FCM)检测A549细胞膜表面IL-22R表达水平。2.逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)测试IL-22刺激A549细胞HBD-2mRNA的动力学表达。3.逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分析两条信号通路(STAT3通路和NF-κB通路)的抑制剂AG490和JSH-23对IL-22诱导A549细胞HBD-2表达及释放的影响。4.免疫印迹法(Western Blotting)测定IL-22刺激A549细胞后STAT3磷酸化水平。5.免疫荧光法(Immunofluorescence)检测IL-22刺激A549细胞后p-STAT3和NF-κB核转位情况。 【结果】1.肺泡II型上皮细胞系A549高度表达IL-22R，阳性率达(99.90±0.13)%。2.IL-22诱导A549细胞HBD-2mRNA表达具有时间和剂量依赖关系。3.STAT3通路阻滞剂AG490显著抑制IL-22诱导的A549细胞HBD-2生成，而NF-κB通路阻滞剂JSH-23对此无抑制作用。4.同时IL-22可显著诱导A549细胞STAT3磷酸化，且刺激p-STAT3核转位，而未见NF-κB核转位。 【结论】 IL-22通过STAT3信号途径显著诱导肺泡II型上皮细胞系A549表达及释放HBD-2。IL-22这一生物学效应对于肺泡局部抗感染将发挥重要作用。
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R363

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本文编号：2721258