哈尔滨五个自然风景区蜱及蜱传病原的调查

发布时间：2020-06-25 12:16

【摘要】：自然风景区的生态多样性,为蜱提供了适合的生存环境。蜱作为多种病原体的传播媒介,通过吸食血液传播多种疾病,许多为重要的人兽共患病,给人类及动物的健康带来危害。本研究拟对哈尔滨五个自然风景区蜱及蜱携带病原情况进行调查,为蜱及蜱传疾病的防控提供依据。第一部分内容:哈尔滨五个自然风景区蜱分布情况的调查。选取哈尔滨5个自然风景区为采样点,应用布旗法共采集到6098只游离蜱。经形态学鉴定主要分为革蜱(3955只)、血蜱(1193只)和硬蜱(950只),发现各景区的优势蜱种均为革蜱。共采集到2993只雌蜱,占总蜱数量的49.08%,3105只雄蜱,占总蜱数量的50.92%,雌雄比例相当。根据采样点、蜱种和雌雄等情况抽取1056只蜱扩增蜱16S r RNA序列进行分子鉴定。发现这些蜱为3属4种,分别是森林革蜱(576只),全沟硬蜱(240只),日本血蜱(239只)和嗜群血蜱(1只)。第二部分内容:哈尔滨五个自然景区蜱携带病原情况的调查。采用二代测序技术对蜱携带细菌调查和常规PCR方法检测部分病原的研究。首先,对1056只蜱携带细菌16S核糖体DNA的V3-V4高变区进行二代测序分析。发现5个景区蜱携带细菌的种类较多,包括许多人兽共患的细菌,如布鲁氏菌科(Brucellaceae)和分支杆菌属(Mycobacterium)等;也包括许多蜱传细菌,如考克斯氏体属(Coxiella)、立克次氏体属(Rickettsia)、无形体属(Anaplasma)、疏螺旋体菌属(Borrelia)和埃立克体属(Ehrlichia)等。研究发现不同地点细菌丰度存在一定的差异,其中帽儿山的蜱携细菌种类最多。不同蜱种间也存在较大差异,革蜱中的蜱传病原菌考克斯氏体属、立克次氏体属和无形体属较其他两种蜱的丰度高。不同性别的蜱间差异较大,雌蜱中的蜱传病原菌立克次氏体属、无形体属、疏螺旋体菌属和埃立克体属的丰度较雄蜱高。其次,进一步采用常规分子生物学方法检测1056只蜱部分重要的蜱携病原。共检测2类病原,分别是伯氏疏螺旋体(Borrelia)和梨形虫(Piroplasma)。伯氏疏螺旋体的检出率是8.05%(85/1056),分为2个基因型,分别是Borrelia garinii 61.18%(52/85),Borrelia afzelii 38.82%(33/85)。原虫共检测到两类病原,巴贝斯虫的检出率是9.38%(99/1056),仅检测到Babesia caballi一种基因型。泰勒虫的检出率是2.56%(27/1056),仅检测到Theileria sinensis一种基因型。综上所述,上述五个自然景区均有蜱的分布,分别为森林革蜱、全沟硬蜱、日本血蜱和嗜群血蜱,其中森林革蜱为优势蜱种。对蜱携带病原的检测发现这些地区蜱携带了相关病原。通过本次调查可以初步掌握哈尔滨部分自然景区蜱及蜱传疾病的第一手资料,为相关地区蜱及蜱传疾病的深入研究提供参考。
【学位授予单位】：黑龙江八一农垦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R384.4
【图文】：

序列,16SrRNA序列,PCR鉴定,地点

其分布受到生存地点，蜱种及性别等采集到的 6098 只蜱进行分析，分析结果如下：地点进行分析发现，松峰山的蜱数量最多为 156其次是凤凰山 1241 只、将军山 1110 只、金龙山的 20.35%（1241/6098），18.20%（1110/6098），18进行分析发现，革蜱的数量最多，有 3955 只，占图 2.2 蜱 16S rRNA 序列 PCR 鉴定结果标准；1：森林革蜱；2：全沟硬蜱；3：日本血Fig. 2.2 PCR results of ITS2 sequence of tick000 marker;1: Dermacentor silvarum; 2: Ixodes per Haemaphysalis japonica; 4: Haemaphysalis conicin

曲线,样品,曲线,自然环境

物种注释及分类学分析.1 OTU 聚类Venn[110]图展示样品之间在不同环境中特有和共有的微生物。本次研究中，因采集的样在自然环境中获得，为了避免环境中的自然菌影响到蜱体内的细菌群结构，因此用蜱品代表外环境中的细菌与蜱组样品进行自然环境中与蜱体内的微生物菌群的区分，通enn 图表示，蜱足中有 678 个 OTU，蜱体中有 707 个 OTU，见于图 3.2。蜱体中的 OT包含了蜱足中 OTU 数量，在蜱体内存在特有 OTU，在后续的分析中，仅对蜱体内细行详细的分析。图 3.1 样品稀疏曲线Fig.3.1 Sample rarefaction curve

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