柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠的治疗作用研究

发布时间：2020-10-13 02:48

　　 目的:研究中药柴黄清胰活血颗粒(Chai Huang Qing Yi Huo Xue Granule,CHG)对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型大鼠的治疗作用,为柴黄清胰活血颗粒的临床运用和新药研究提供实验依据。方法:(1)动物分组:将144只成年健康雄性SD大鼠随机分为6组:假手术组(sham-operation group,Sham),SAP模型组,柴黄清胰活血颗粒低、中、高剂量组(即CHG1、CHG2、CHG3),阳性对照清胰利胆颗粒组(Qing Yi Li Dan Granule,QYG),每组24只。(2)SAP造模:采用经十二指肠乳头逆行胰胆管注射3.5%牛磺胆酸钠(Sodium taurocholate,STC)1ml/kg的方法制备大鼠SAP模型;假手术组开腹后仅翻动腹腔脏器后关腹。(3)药物配制:将柴黄清胰活血颗粒流浸膏以90℃蒸馏水溶解后,分别配制为0.04g/ml、0.08g/ml、0.16g/ml浓度的药液,清胰利胆颗粒用90℃蒸馏水溶解后配制为0.1g/ml浓度的药液,配制好的药液按大鼠体重计算,每次10ml/kg灌胃。(4)给药:待手术完成各组大鼠麻醉苏醒后,柴黄清胰活血颗粒低、中、高剂量组分别予以柴黄清胰活血颗粒流浸膏0.04g/ml、0.08g/ml、0.16g/ml浓度的药液灌胃,清胰利胆颗粒组予以清胰利胆颗粒0.1g/ml的药液灌胃,每次10ml/kg,每4小时1次,假手术组及SAP模型组灌胃等量生理盐水。所有大鼠术后禁食,自由饮水。(5)取材检测:术后12h、24h、48h共3个时间点,每个时间点每个组别各处死大鼠8只,开腹大体解剖观察后,采用注射器抽吸和无菌棉球吸拭相结合的方法收集腹水,并称量计重;腹腔动脉采血,用血细胞分析仪检测全血白细胞(white blood cell,WBC)计数,用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶(serum amylase,AMY)、血清脂肪酶(lipase,LIP)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、肌酸激酶-同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血糖(blood glucose,GLU)、钙离子(calcium ion,Ca~(2+));采用双抗夹心酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α);完整取出胰腺组织,胰头部胰腺用天平称重,在60℃恒温干燥箱中干燥48h至胰腺体重不再改变后称重,计算胰腺干湿比;胰体部用4%中性甲醛浸泡24h后做石蜡包被切片,行苏木素-伊红(haematoxylin-eosin staining,HE)染色,在光镜下用Kusske评分法对胰腺病理组织进行双盲评分。结果:(1)与假手术组比较,SAP模型组大鼠大体解剖观察见胰腺组织体积变大,胰腺出现充血、水肿、出血、坏死,胰腺及肠系膜明显皂化斑,大量黄绿色或淡红色腹腔积液,胃肠积气、鼓胀、扩张,肠壁充血、水肿,腹腔脏器黏连。胰腺组织HE染色表现为胰腺结构紊乱,甚至严重破坏,腺泡水肿,小叶间隔增大,明显出血,大量坏死灶及炎细胞浸润。SAP模型组大鼠胰腺干湿比降低,胰腺组织病理评分升高,血清AMY、LIP活性增加,全血白细胞计数及血清CRP、TNF-α水平升高,钙离子浓度降低,血糖浓度升高,肝功能受损(AST、ALT活性升高),肾功能受损(BUN浓度升高),差异均有统计学意义(p0.05),提示SAP模型大鼠造模成功。(2)与SAP模型组比较,柴黄清胰活血颗粒不同剂量组和清胰利胆颗粒组大体解剖观察见胰腺体积稍增大,出现充血、水肿及坏死改变,胰腺及周围少许皂化斑,大体改变跟SAP模型组相似,但病变程度较之减轻,尤其是柴黄清胰活血颗粒高剂量组,坏死范围小,散在分布,腹水量少。胰腺组织HE染色见胰腺结构基本正常,小叶间充血水肿,少量出血,局灶性坏死灶,少许炎细胞浸润。柴黄清胰活血颗粒不同剂量组和清胰利胆颗粒组能减轻胰腺水肿,改善胰腺组织病理评分,降低血清AMY、LIP活性,减少全血白细胞计数及血清CRP、TNF-α含量,升高钙离子浓度,降低血糖浓度,保护肝功能(AST、ALT活性降低)、肾功能(BUN浓度降低),与SAP模型组比较上述各指标差异均有统计学意义(p0.05),提示柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠有治疗作用,且其疗效呈剂量依赖性。(3)与清胰利胆颗粒组比较,柴黄清胰活血颗粒高剂量组在降低腹水量,改善胰腺组织病理评分,减少全血白细胞计数及血清CRP、TNF-α含量,保护肝功能(AST、ALT活性降低)等方面,差异均有统计学意义(p0.05),提示高剂量的柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠的治疗作用优于清胰利胆颗粒。结论:(1)柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠有治疗作用,且其疗效呈剂量依赖性。(2)高剂量的柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠的治疗作用优于清胰利胆颗粒。
【学位单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5;R-332
【部分图文】：

图 1 SAP 大鼠模型的建立Fig.1 Establishment of SAP rat model2.3 动物给药和观察术后大鼠麻醉清醒后开始灌胃给药。柴黄清胰活血颗粒低、中、高剂量组和清胰利胆颗粒组用上述配置好的药液按大鼠体重 10ml/kg 灌胃，每4 小时 1 次。假手术组和 SAP 模型组灌胃等量生理盐水。所有大鼠禁食，自由饮水。2.4 标本的采集分别于术后 12h、24h、48h 三个时间点各处死大鼠 8 只取材。以 3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉（1ml/kg）大鼠，开腹后取腹水、血标本及胰腺。2.4.1 腹水的采集

图 2 ELISA 法检测大鼠血清 TNF-α水平标准曲线图Fig. 2 Standard curve of serum TNF-α level in rats by ELISA.6 血清 CRP 的检测采用 ELISA 法检测，检测原理、操作步骤同 TNF-α，严格按照实验作步骤进行。.7 胰腺组织石蜡包被切片染色.7.1 胰腺组织石蜡包被切片（1）将新鲜胰腺组织放置于 4%中性甲醛溶液中浸泡 24h 固定；（2）分水洗；（3）70%乙醇脱水 30min，80%乙醇脱水 30min，95%乙醇两各 15min，100%乙醇两道各 10min，纯二甲苯两道各 1h；（4）浸泡石

1.1 假手术组 12h、24h、48h 各时间段肉眼观察，胰腺无明显变化，大小正常，薄片状，颜色淡红光泽，均匀一致，质地柔软，无充血、水肿、坏死改变，胰腺、肠系膜无皂化斑；腹腔内无明显积液，偶见少许血性腹水，考虑为大鼠开腹时手术切口渗出所致。1.2 SAP 模型组 胰腺组织体积变大，胰腺呈不同程度充血、水肿、出血、坏死。12h 时颜色鲜红，充血水肿明显，部分呈黄绿色脓肿样改变，可见少许钙化斑；24h 时颜色稍淡，水肿坏死明显，可见明显钙化斑；48h 时颜色偏白，质地稍硬，坏死改变明显、范围大，可从胰头部延伸到脾区，胰腺表面、肠系膜、腹膜等均可见大片黄色凝脂状皂化斑。各时间段均可见腹腔积液，呈黄绿色或淡红色；胃肠积气、鼓胀、扩张，肠壁充血、水肿，腹腔脏器黏连。见图 3。
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 宋歌;吕月涛;狄林林;宗文纳;陈伯旺;;早期肠内营养对重症肺炎大鼠免疫功能的影响分析[J];中国医学前沿杂志(电子版);2017年01期

2 叶敏;陈达柔;陈宇中;杜少冰;杜展鑫;李玉凤;唐珮瑜;杨昌山;朱晓琴;;右美托咪定后处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用[J];临床医学工程;2017年02期

3 王雅乐;李文泉;姚凤云;;黄连解毒汤对营养性肥胖大鼠的毒性研究[J];光明中医;2017年10期

4 关智宇;;三七总皂甙对骨折大鼠血管内皮生长因子基因扩增及蛋白表达水平影响的研究[J];临床医药文献电子杂志;2017年51期

5 王帅;贾琦珍;陈根元;程勇;张玲;马春晖;;小花棘豆中毒对大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴α-甘露糖苷酶的影响[J];福建农林大学学报(自然科学版);2016年01期

6 周挺;夏菁;李增攀;徐丽艳;韩文文;方建江;;法舒地尔对百草枯致大鼠肺纤维化的干预作用[J];浙江实用医学;2016年01期

7 王亚东;李东朋;郭德伟;宋及时;李红伟;钱伟强;杨波;;富血小板血浆对创伤性颅脑损伤大鼠神经功能的保护作用[J];吉林大学学报(医学版);2016年05期

8 郑国祥;于强;;白虎汤对全身炎症反应综合征大鼠炎症因子的影响[J];四川中医;2015年01期

9 符晖;王桥生;方志雄;刘雁;周斌;彭忠田;梁咸章;;辛伐他汀预处理对大鼠神经源性肺水肿的作用及其机制[J];中国动脉硬化杂志;2015年10期

10 商明红;何龙其;;西维来司钠对大鼠脑出血保护作用机制的实验研究[J];现代养生;2017年10期

相关博士学位论文 前10条

1 张雪莹;LncRNA CD36-005在PCOS大鼠模型子宫中的表达及相关功能的研究[D];吉林大学;2019年

2 潘磊磊;Orexin-A对晕动症缓解作用机制的研究[D];中国人民解放军海军军医大学;2019年

3 成晨;NPPA基因突变通过激活炎症和心肌纤维化引起房颤[D];华中科技大学;2019年

4 石艳;空间学习通过上调海马miR-191改善慢性应激诱导的大鼠抑郁行为[D];华中科技大学;2018年

5 江弘炀;大鼠肾脏内草酸转运体Slc26a6的表达对实验性草酸钙结石形成的作用研究[D];华中科技大学;2019年

6 卞艺斐;马齿苋对实验性肠炎大鼠的保护作用及其机制研究[D];中国农业大学;2018年

7 白方会;正天丸和川芎嗪对偏头痛模型大鼠三叉神经血管系统神经递质表达的影响[D];南方医科大学;2016年

8 顿晶晶;补肾中药更康颗粒的药效学及急性毒理实验研究[D];广州中医药大学;2016年

9 穆道周;芍药苷抗抑郁促动力作用的实验研究[D];南京中医药大学;2016年

10 王跃旗;枫寥肠胃康对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠动力及氯离子分泌的影响[D];北京中医药大学;2017年

相关硕士学位论文 前10条

1 金伟中;出生前尼古丁暴露对新生大鼠orexin A呼吸调节作用的影响[D];复旦大学;2009年

2 胡湘;有氧运动对CUMS大鼠学习记忆及海马SYP、PSD-95的影响[D];成都体育学院;2019年

3 叶琪;有氧运动对CUMS大鼠下丘脑AVP的影响[D];成都体育学院;2019年

4 关雪峰;MiR-204-5p通过靶基因Cav-1调节大鼠血管平滑肌细胞增殖的研究[D];吉林大学;2019年

5 牛泽峰;锌预处理通过促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化并降低自噬修复大鼠脊髓缺血再灌注损伤的作用机制研究[D];吉林大学;2019年

6 董阳;Aicardi-Goutieres综合征相关基因SAMHD1敲除大鼠模型的构建及分析[D];安徽医科大学;2019年

7 刘京京;IL-28B在SD大鼠非酒精性脂肪性肝炎形成中的作用研究[D];延安大学;2019年

8 鲍璐璐;TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在腹泻型肠易激综合征中的作用及机制研究[D];安徽医科大学;2019年

9 段声梁;烧伤大鼠血清对血管内皮细胞通透性影响[D];安徽医科大学;2019年

10 胡珊珊;IL-6下调腺苷A3受体信号促进胶原性关节炎大鼠Thl7细胞分化的机制研究[D];安徽医科大学;2019年

本文编号：2838628