肝组织切片不同保存时间抗原丢失比较

发布时间：2020-10-16 05:29

　　 目的观察肝组织切片室温条件下存放不同时间,组织细胞抗原变化。方法复制大鼠肝纤维化模型,30%CCl_4橄榄油溶液2 mL·kg~(-1)皮下注射,每周2次,共计6周;第7周开始加10 mg·kg~(-1)·d~(-1) 2-AAF灌胃3周,9周末处死大鼠。大鼠肝组织连续切片12张,分成3组(分别用于HE、天狼猩红胶原与免疫组化染色),每组4张(用于0、24、48、96周共4个不同时间点)。切片于常温空气中分别放置0、24、48、96周时浸蜡封片,96周时全部切片脱蜡至水进行HE染色、天狼猩红胶原染色及细胞膜蛋白抗原CK7、细胞浆蛋白抗原SHH与细胞核蛋白抗原HNF 4α免疫组化染色,观察肝组织炎症情况及Image-Pro Plus 6.1软件分析胶原面积与不同部位组织细胞抗原变化。结果组织切片室温放置0～96周肝脏炎症无明显改变;随着放置时间从0周延长至96周,胶原面积逐渐减少,96周时显著减少为0周的64.54%～74.44%(P0. 05)。免疫组化染色显示,0周CK7阳染面积为12.70%±0.90%;随着放置时间延长,CK7阳染色面积逐渐减少,24、48与96周时CK7阳染面积分别为0周的71.02%、47.01%与35.16%(P0.05);0周SHH阳染面积为45.44%±6.11%,随着放置时间延长,24、48与96周时SHH阳染面积分别占0周的49.38%、26.32%与20.77%(P0.01);0周HNF4α阳染面积为9.38%±0.62%;随着放置时间延长,24、48与96周时HNF4α阳染面积分别占0周的47.76%、14.50%与11.41%(P0. 05)。结论肝组织切片室温条件下不同保存时间的细胞膜、细胞浆、细胞核抗原明显丢失,切片浸蜡封片能防止组织细胞抗原丢失。
【文章目录】：
资料与方法
    一、实验动物
    二、主要试剂
    三、研究方法
        (一)模型制备
        (二)样品的采集和处理
        (三)肝组织石蜡切片保存
        (四)肝组织HE与天狼星红胶原染色
        (五)肝组织免疫组化染色
    四、统计学方法
结 果
    一、肝组织细胞膜、细胞浆与细胞核抗原表达变化
    二、肝组织炎症和胶原沉积变化
讨 论

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本文编号：2842834