黄芩素通过促进miR-29a-3p抑制MAP2K6改善骨性关节炎模型大鼠软骨细胞退化
发布时间：2020-10-24 08:01
目的:探索黄芩素(Baicalein)改善软骨细胞退化的可能机制。方法:用不同浓度黄芩素处理OA大鼠,观察软骨退化情况,并检测炎性细胞因子水平。用不同剂量黄芩素处理OA细胞模型,检测各组细胞的活力及凋亡情况,双荧光素酶报告验证miR-29a-3p、MAP2K6的靶向关系。结果:与假手术组比较,OA模型组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著增高,细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著增高,与模型对照组比较,黄芩素10、20、30 mg/kg能够显著降低OA模型血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,能够显著改善OA大鼠软骨细胞活性抑制及凋亡情况,能够缓解OA模型软骨组织番红氧失染情况;miR-29a-3p与MAP2K6存在靶向关系,黄芩素10μmol/L能够明显下调OA细胞中MAP2K6、p38/p-p38、MAX蛋白表达水平。结论:黄芩素可以通过调节miR-29a-3p靶向抑制MAP2K6的磷酸化,提高软骨细胞活性,抑制细胞凋亡从而改善OA引起的软骨细胞退化。
【部分图文】：
假手术组软骨表面光滑,无裂隙,细胞分布均匀,番红氧染色均染,无失染情况;模型组软骨出现大量的缺损及裂隙,细胞数减少,潮线消失,番红氧染色重度或完全失染;黄芩素 10 mg/kg组软骨表面有裂隙生成,深达中间层,软骨细胞增多,同源细胞群增多,番红氧染色中重度失染;黄芩素 20 mg/kg组软骨表面裂隙较少,表面平整,番红氧染色轻中度失染;黄芩素 30 mg/kg组软骨表面无明显裂隙,表面平整,番红氧染色均匀,无失染情况,塞来昔布组与黄芩素 30 mg/kg组结果相似。见图1、表1。表1 番红氧染色评价黄芩素对OA模型大鼠软骨组织分级程度分布的影响(n=6,只) 组别 剂量/(mg/kg) 样本数 软骨表面细胞光滑,无裂隙,细胞分布均匀,番红染色均染,无失染情况 软骨表面无明显裂隙,表面基本平整,番红氧染色均匀,无明显失染情况 软骨表面存在裂隙,表面较平整,番红氧染色轻中度失染 软骨表面大量的缺损及裂隙,细胞数减少,潮线消失,番红氧染色重度或完全失染 假手术 6 5 1 0 0 模型对照 6 0 0 1 5 塞来昔布 40 6 2 4 0 0 黄芩素 10 6 0 1 4 1 黄芩素 20 6 0 4 2 0 黄芩素 30 6 3 3 0 0
表2 黄芩素对OA模型大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 剂量/(mg/kg) IL-1β/(pg/mL) IL-6/(pg/mL) TNF-α/(pg/mL) 假手术 30±11** 28±11** 83±22** 模型对照 165±26 155±25 333±45 塞来昔布 40 41±12** 32±13** 92±20** 黄芩素 10 126±28* 109±29* 266±37* 黄芩素 20 86±17** 84±18** 193±29** 黄芩素 30 72±16** 57±15** 132±36** 与模型组比较 * P<0.05,** P<0.01(下同)。表3 黄芩素对OA软骨细胞凋亡及活力的影响 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 剂量/(μmol/L) 细胞凋亡/(%) 细胞活力/(%) 正常对照 6.3±1.2** 100.0±8.0** 模型对照 36.8±3.0 36.0±8.0 塞来昔布 200 mg/孔 8.8±1.6** 92.0±6.0** 黄芩素 2.5 25.9±2.2* 55.0±12.0* 黄芩素 5 18.6±1.8* 68.0±11.0* 黄芩素 10 9.5±1.3** 86.0±9.0**
表5 转染miR-29a-3p mimic对软骨细胞中miR-29a-3p、MAP2K6表达水平的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 miR-29a-3p/2-△△Ct MAP2K6/2-△△Ct miR-29a-3p过表达 50.00±6.00** 0.17±0.05* 阴性对照 1.00±0.12 1.00±0.11 对照 1.00±0.15 1.00±0.10 与对照组比较 * P<0.05,**P<0.01。2.5 QRT-PCR及Wentern blet法检测黄芩素对OA软骨细胞miR-29a-3p/MAP2K6基因和蛋白表达调控的影响
【相似文献】
本文编号：2854211
【部分图文】：
假手术组软骨表面光滑,无裂隙,细胞分布均匀,番红氧染色均染,无失染情况;模型组软骨出现大量的缺损及裂隙,细胞数减少,潮线消失,番红氧染色重度或完全失染;黄芩素 10 mg/kg组软骨表面有裂隙生成,深达中间层,软骨细胞增多,同源细胞群增多,番红氧染色中重度失染;黄芩素 20 mg/kg组软骨表面裂隙较少,表面平整,番红氧染色轻中度失染;黄芩素 30 mg/kg组软骨表面无明显裂隙,表面平整,番红氧染色均匀,无失染情况,塞来昔布组与黄芩素 30 mg/kg组结果相似。见图1、表1。表1 番红氧染色评价黄芩素对OA模型大鼠软骨组织分级程度分布的影响(n=6,只) 组别 剂量/(mg/kg) 样本数 软骨表面细胞光滑,无裂隙,细胞分布均匀,番红染色均染,无失染情况 软骨表面无明显裂隙,表面基本平整,番红氧染色均匀,无明显失染情况 软骨表面存在裂隙,表面较平整,番红氧染色轻中度失染 软骨表面大量的缺损及裂隙,细胞数减少,潮线消失,番红氧染色重度或完全失染 假手术 6 5 1 0 0 模型对照 6 0 0 1 5 塞来昔布 40 6 2 4 0 0 黄芩素 10 6 0 1 4 1 黄芩素 20 6 0 4 2 0 黄芩素 30 6 3 3 0 0
表2 黄芩素对OA模型大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 剂量/(mg/kg) IL-1β/(pg/mL) IL-6/(pg/mL) TNF-α/(pg/mL) 假手术 30±11** 28±11** 83±22** 模型对照 165±26 155±25 333±45 塞来昔布 40 41±12** 32±13** 92±20** 黄芩素 10 126±28* 109±29* 266±37* 黄芩素 20 86±17** 84±18** 193±29** 黄芩素 30 72±16** 57±15** 132±36** 与模型组比较 * P<0.05,** P<0.01(下同)。表3 黄芩素对OA软骨细胞凋亡及活力的影响 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 剂量/(μmol/L) 细胞凋亡/(%) 细胞活力/(%) 正常对照 6.3±1.2** 100.0±8.0** 模型对照 36.8±3.0 36.0±8.0 塞来昔布 200 mg/孔 8.8±1.6** 92.0±6.0** 黄芩素 2.5 25.9±2.2* 55.0±12.0* 黄芩素 5 18.6±1.8* 68.0±11.0* 黄芩素 10 9.5±1.3** 86.0±9.0**
表5 转染miR-29a-3p mimic对软骨细胞中miR-29a-3p、MAP2K6表达水平的影响 ( x ˉ ±s,n=6) 组别 miR-29a-3p/2-△△Ct MAP2K6/2-△△Ct miR-29a-3p过表达 50.00±6.00** 0.17±0.05* 阴性对照 1.00±0.12 1.00±0.11 对照 1.00±0.15 1.00±0.10 与对照组比较 * P<0.05,**P<0.01。2.5 QRT-PCR及Wentern blet法检测黄芩素对OA软骨细胞miR-29a-3p/MAP2K6基因和蛋白表达调控的影响
【相似文献】
相关期刊论文 前2条
1 毛竹君;翁思颖;王磊;柴可夫;;小檗碱调控IR-HepG2细胞miR-29a-3p及胰岛素受体信号通路的作用机制研究[J];中华中医药杂志;2018年12期
2 何李乐;王万春;;淫羊藿素对大鼠软骨细胞作用的实验研究[J];中南大学学报(医学版);2015年05期
本文编号：2854211
本文链接：https://www.wllwen.com/xiyixuelunwen/2854211.html
