Foxp3在DC细胞中的表达及其对免疫调节作用的影响

发布时间：2017-04-06 01:02

  本文关键词：Foxp3在DC细胞中的表达及其对免疫调节作用的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：不同处理的树突状细胞(Dendritic cells,DC)胞内Foxp3的表达对其免疫调节作用的影响。方法：提取BABL/C小鼠骨髓,用含有GM-CSF (10ng/ml)和IL-4 (10ng/ml)的RPMI-1640培养基诱导生成DC,在此基础上给予不同的刺激,分组包括,未成熟DC组(immature dendritic cells,imDC):5d-imDC组及MSCs组；成熟DC组(mature dendritic cells,mDC):ODN1585组,R848组,LPS组。分别检测其表型变化及胞内Foxp3的表达。用BABL/C小鼠的DC+C57BL/6小鼠的CD4+T细胞进行共培养实验,CCK-8检测T细胞的增殖情况；qPCR方法检测T细胞T-bet、GATA-3、R ORγt、Foxp3的表达,CBA检测共培养体系上清液中细胞因子表达水平,分析DC对CD4+T细胞分化的影响。结果：首先流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的表达结果显示5d-imDC及MSCs组表面共刺激分子CD80、CD86的表达较mDC组(ODN1585组,R848组,LPS组)低,表明5d-imDC及MSCs处理的DC保持了其未成熟性。接着本实验分别从基因及蛋白水平检测DC中Foxp3表达,结果显示imDC胞内Foxp3的表达明显高于mDC (P0.05),各组mDC中表达的Foxp3无明显差异。为了判断各组DC对T缉胞的影响,本实验检测了CD4-T增殖分化情况,增殖结果显示：5d-imDC及MSCs-DC能抑制CD4+T细胞增殖(P0.05)；而mDC能促进CD4+T细胞增殖(P0.05)分化结果显示5d-imDC及MSCs-DC中GATA-3、Foxp3的表达较其他各组高,表达的T-bet、RORyt较其他组低,表明imDC可以诱导CD4+T细胞向免疫抑制性的T细胞亚型分化,而mDC可以诱导CD4+T细胞向Thl方向分化。最后本实验检测了共培养上清液中细胞因子表达,结果表明5d-imDC及MSCs-DC中IL-4、IL-10分泌量其他各mDC组高(P0.05),分泌IFN-γ、TNF-a和IL-17A较其他mDC组低(P0.05),证明imDC可以诱导CD4+T细胞向免疫抑制功能的细胞分化并且诱导T细胞分泌更多的免疫抑制性细胞因子。结论：高表达Foxp3的imDC可以抑制CD4-T的增殖,并且促进其向抑炎性的Th2和Treg分化。
【关键词】：树突状细胞 Foxp3 免疫耐受
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-11
• 材料和方法11-21
• 结果21-36
• 讨论36-40
• 结论40-41
• 参考文献41-45
• 综述45-53
• 参考文献50-53
• 缩略词表53-55
• 攻读学位期间公开发表的论文55-56
• 致谢56-58

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