肠炎沙门菌pagC基因缺失株构建及其相关生物学特性研究

发布时间：2020-11-14 05:38

　　 目的研究肠炎沙门菌外膜蛋白PagC的生物学功能以及在肠炎沙门菌致病过程中的作用。方法利用λ-Red同源重组系统构建了肠炎沙门菌(C50336)pagC基因缺失突变(C50336Δhtra),在此基础上构建基因回补菌株。测定肠炎沙门菌各菌株在培养基中的生长曲线;利用生化鉴定系统测定各菌株的生化特性;分析肠炎沙门菌各菌株在酸性、碱性和高渗环境下的存活能力;利用K-B纸片法测定肠炎沙门菌各菌株的耐药性。结果成功构建了肠炎沙门菌pagC基因缺失株C50336ΔpagC。生长曲线显示,与野生型菌株和回补菌株相比,C50336ΔpagC缺失株生长速度、生化特性无明显差异,表明pagC不影响肠炎沙门菌的生长特性。应激实验结果显示,pagC基因缺失后,肠炎沙门菌应对酸碱应激和高盐应激能力显著下降,表明pagC影响肠炎沙门菌应激条件下生存。药物敏感性试验结果显示,pagC基因缺失后,肠炎沙门菌对多种抗菌药物敏感性增高,表明pagC参与肠炎沙门菌耐药过程。结论 PagC蛋白与细菌抗环境应激和耐药性相关,为进一步阐释肠炎沙门菌致病机制和耐药机理奠定基础。
【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 λ-Red 同源重组引物的设计
        1.2.2 肠炎沙门菌pagC基因缺失株及回补菌株的构建
        1.2.3 肠炎沙门菌生物学特性检测
        1.2.4 肠炎沙门菌对环境应激抵抗力的测定
        1.2.5 耐药性鉴定
2 结 果
    2.1 肠炎沙门菌C50336pagC基因缺失株的构建
    2.2 pagC基因缺失对肠炎沙门菌生物学特性的影响
    2.3 pagC基因缺失对肠炎沙门菌抗环境应激能力影响
    2.4 肠炎沙门菌pagC基因缺失株耐药性分析
3 讨 论

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