裸鼹鼠海马神经元纯化模型建立及其低氧耐受特性机制的初步研究

发布时间：2021-01-02 01:20

　　目的建立一种裸鼹鼠海马神经元的纯化培养方法,并初步探讨其低氧耐受特性。方法收集妊娠60～65 d裸鼹鼠胚胎海马组织内的细胞,利用含有Neurobasal+2%B27+10μmol/L5-氟尿嘧啶的培养基进行神经元纯化,海马神经元维持培养基为含有体积分数2%B27的Neurobasal培养基。体外贴壁培养6～7 d,采用倒置显微镜观察细胞的生长状态,利用神经元特异核蛋白（NeuN）抗体进行鉴定。利用CCK8试剂盒进行海马神经元低氧耐受功能的研究（低氧浓度为8%）。利用QPCR检测海马神经元中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在低氧情况下的表达水平。结果通过本方法获得的海马神经元具有典型的神经元形态特征,免疫细胞化学染色显示纯化所得的细胞均呈NeuN阳性,低氧条件下细胞存活率、轴突长度显著大于常氧情况下的数值,低氧情况下裸鼹鼠海马神经元中HIF1α显著高于常氧情况,上述结果差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论建立了一种简单实用的体外分离培养裸鼹鼠海马神经元的方法,初步揭示了裸鼹鼠海马神经元低氧耐受特性,并且该特性与裸鼹鼠海马神经元于低氧情况下高表达HIF1α有关。 

【文章来源】：实验动物与比较医学. 2019年06期

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

光学显微镜下的裸鼹鼠海马神经元

低氧处理后海马神经元轴突长度[(56±9)μm]是常氧环境下[(33±6)μm]的2倍左右(P<0.05)(图4)。图3 CCK8检测裸鼹鼠海马神经元在低氧环境中存活情况

图2 裸鼹鼠海马神经元免疫荧光染色低氧情况下裸鼹鼠海马神经元中HIF1α的表达水平(相对数值1.0)是常氧时(相对数值3.2±0.5)的3倍以上(P<0.05)。

【参考文献】：
期刊论文
[1]裸鼹鼠在生物医学研究中的应用前景[J]. 崔淑芳.  中国实验动物学报. 2016(03)
[2]不同氧浓度对裸鼹鼠原代鼠星形胶质细胞增殖及生长状态的影响[J]. 杨文静,聂玉梅,肖邦,林丽芳,孙伟,汤球,赵善民,程继帅,丛薇,蔡丽萍,崔淑芳.  实验动物科学. 2016(03)
[3]氯化钴诱导低氧对裸鼹鼠肝星形细胞增殖及凋亡的影响[J]. 肖邦,李莉,余琛琳,赵善民,林丽芳,杨文静,丛薇,崔淑芳.  实验动物与比较医学. 2016 (01)



本文编号：2952366