基于P38信号通路探究温阳振衰颗粒对阿霉素所致慢性心力衰竭模型兔心肌细胞P38表达及凋亡的影响

发布时间：2017-04-10 22:24

  本文关键词：基于P38信号通路探究温阳振衰颗粒对阿霉素所致慢性心力衰竭模型兔心肌细胞P38表达及凋亡的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：通过观察温阳振衰颗粒对慢性充血性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)模型兔的作用,探讨抑制剂SB203580对于在体动物的使用,进一步研究SB203580的有效使用剂量方法,且根据血清NT-proBNP、p38总蛋白和p38磷酸化蛋白、p38mRNA水平表达和电镜下心肌细胞的影响,探讨温阳振衰颗粒其治疗CHF的作用机制。 方法： 第一阶段：将40只健康普通级新西兰兔随机抽取为正常对照组、模型对照组、P3840ug组、P3820ug组、P38空白组、DMSO阿霉素组、DMSO空白组、依那普利组。每组实验兔5只。连续药物处理4周后,取心脏组织,并采用Western-blot和检测P38总蛋白、P38磷酸化的表达水平和P38mRNA。 第二阶段：从第一阶段所得结论,将56只兔子,将实验兔随机分为8组,每组7只实验兔。分别为：正常对照组、模型对照组、温阳振衰组、依那普利组、P38抑制剂+阿霉素组、P38抑制剂40u1组、DMSO组、DMSO组+阿霉素组。8周后,取实验兔心脏,检验实验兔血清NT-proBNP、心肌细胞凋亡、P38总蛋白、P38磷酸化蛋白、p38mRNA水平,以及电镜下心肌细胞形态结构。 结果： 第一阶段： 造模4周后各组间P38比较,经过SB和药物干预后,心肌P38均不同程度上升,其中以模型对照组上升最为明显(P0.05)。SB低、高剂组和阳性对照组心肌P38水平上升较模型对照组缓慢(P0.05),其中SB高剂组心肌P38水平升高最为缓慢(P0.05)。各组在4周末心肌p38总蛋白及心肌p38mRNA水平与其余各组相比差异无显著性意义(P0.05)。 第二阶段： 1.各组血清NT-proBNP:造模8周后,各组血清NT-proBNP均不同程度上调,各实验组均高于正常对照组、DMSO组、SB空白组,差异具有统计学意义(P0.05),阿霉素对照组最高(P0.05)。SB抑制剂组、依那普利对照组、温阳振衰组血清NT-proBNP水平均有升高。(P0.05),其中以温阳振衰血清NT-proBNP水平升高最为缓慢(P0.05)。 2.各组心肌凋亡指数：造模8周后,各组心肌细胞凋亡指数均不同程度上调,与正常对照组比较,差异具有统计学意义(P0.05),其中以阿霉素DMSO组上调最为明显(P0.05)。温阳振衰组、依那普利对照组、SB抑制剂组心肌细胞凋亡指数水平上调较阿霉素DMSO组缓慢(P0.05),其中以SB抑制剂组心肌细胞凋亡指数升高最为缓慢(P0.05)。 3.各组P38总蛋白和P38mRNA变化,8周造模后各组差异均无统计学意义(P0.05)。 4.各组P-P38变化：各组P38磷酸化的蛋白水平均不同程度上调,与正常对照组比较,差异具有统计学意义(P0.05),其中以阿霉素组上调最为明显(P0.05)。DMSO阿霉素组与阿霉素对照组比较,以及DMSO空白组与正常空白组比较P38磷酸化的蛋白水平分别相比差异无显著性意义(P0.05)。实验各组心肌细胞P38磷酸化的蛋白水平相比差异无显著性意义(P0.05)。SB抑制剂组和依那普利对照组、温阳振衰组P38磷酸化的蛋白水平上调较模型对照组缓慢(P0.05),其中以温阳振衰组最为缓慢(P0.05)。 5.各组心肌细胞电镜结果：电镜结果显示模型对照组及药物干预各组均可见肌纤维坏死或萎缩,部分线粒体水肿、空泡化,肌丝结构不清,可见炎性细胞浸润。SB40抑制剂组、依那普利组、温阳振衰组电镜下改变相对于模型对照组为轻,温阳振衰组在这三组中最轻。 结论： 1.抑制剂在体内使用长时间有效剂量为SB40ul组,持续皮下注射4周能显著降低P38蛋白磷酸化的水平。 2.温阳振衰颗粒可通过调节心衰模型兔的心脏功能,降低血清NT-proBNP、P38磷酸化蛋白水平表达和改善心肌细胞结构,对P38总蛋白、P38mRNA无明显改变,从而防止和延缓CHF的进一步恶化,温阳振衰组疗效与SB抑制剂组有相似的作用。
【关键词】：温阳振衰颗粒 慢性充血性心力衰竭 抑制剂 P38
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 英文~.略词表6-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-11
• 引言11-14
• 第一部分 实验研究14-24
• 1 材料14-15
• 1.1 实验动物14
• 1.2 动物饲料14
• 1.3 实验药物14-15
• 1.3.1 造模药物14
• 1.3.2 受试药物14
• 1.3.3 阳性药物14
• 1.3.4 麻醉药物14-15
• 1.4 实验试剂15
• 1.5 实验仪器15
• 2 实验条件15
• 3 实验设计15-24
• 3.1 第一阶段实验16-18
• 3.1.1 分组方法16
• 3.1.2 病理模型表达诱导16
• 3.1.3 给药方法16
• 3.1.4 样本采集与检测16-18
• 3.1.4.1 心肌组织总蛋白质提取16-17
• 3.1.4.2 Western-blot检测17-18
• 3.1.4.3 RT-PCR分析18
• 3.1.5 统计学方法18
• 3.2 第二阶段实验18-24
• 3.2.1 分组方法18-20
• 3.2.2 观察指标及方法20-23
• 3.2.2.1 基础状态20
• 3.2.2.2 血浆BNP的检测20
• 3.2.2.3 心肌细胞凋亡检测20-21
• 3.2.2.4 P38总蛋白和P38磷酸化水平的表达21
• 3.2.2.5 P38mRNA转录水平的表达21
• 3.2.2.6 心肌组织病理切片电镜观察21-22
• 3.2.2.7 心肌组织病理切片光镜观察22-23
• 3.2.3 统计学处理方法23-24
• 第二部分 结果与分析24-33
• 1 第一阶段实验结果及分析24-26
• 1.1 一般情况24
• 1.2 实验后各组间心肌P38的表达24-26
• 1.3 结果26
• 2 第二阶段实验结果及分析26-33
• 2.1 实验后各组血清NT-proBNP的变化26-27
• 2.2 实验后各组心肌细胞凋亡指数的变化27-28
• 2.3 P38总蛋白和P38磷酸化的蛋白水平的表达28-30
• 2.4 P38-mRNA的表达30-31
• 2.5 实验后各组间心肌组织透射光镜观察31-32
• 2.6 实验后各组间心肌组织透射电镜观察32-33
• 第三部分 讨论33-44
• 1 CHF的中医认识及治疗研究33-36
• 1.1 病名源流33
• 1.2 病因病机33-35
• 1.2.1 心气虚是慢性心衰发病的始动因素33-34
• 1.2.2 阳气虚衰是病机关键34-35
• 1.3 关于治疗的记载35-36
• 2 CHF的西医认识及治疗研究36-40
• 2.1 病理生理认识36-39
• 2.1.1 神经体液作用机制学说36-37
• 2.1.2 细胞凋亡学说37-38
• 2.1.3 心衰发病中细胞信号传的研究现状38-39
• 2.2 治疗研究39-40
• 3 导师对本病的认识40
• 4 温阳振衰颗粒的方解及现代药理研究40-43
• 4.1 温阳振衰颗粒方解40-41
• 4.2 现代药理研究41-43
• 5 温阳振衰颗粒治疗CHF的作用机制分析43
• 6 温阳振衰颗粒的研究展望43-44
• 第四部分 结论44-45
• 致谢45-46
• 附录A：心肌凋亡结果46-48
• 附录B：心肌组织光镜结果48-50
• 附录C：心肌组织电镜结果50-52
• 参考文献52-55
• 综述55-63
• 参考文献61-63

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张频捷;朱立新;耿小平;;p38 MAPK信号传导通路及其抑制剂的研究现状[J];安徽医药;2010年05期

2 章燕;戴小华;;益气活血中药改善急性心肌梗死后左心室重构实验研究进展[J];安徽中医学院学报;2012年02期

3 张凤;戴小华;;调脾护心方治疗心脾两虚证慢性心力衰竭疗效观察[J];中医药临床杂志;2014年05期

4 高淑彩;;参麦注射液联合西医治疗慢性心力衰竭76例疗效观察[J];河北中医;2012年05期

5 任澎;张巍;刘永国;李U

本文编号：297658