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重组腺病毒介导BMP-2/bFGF体外诱导山羊BMSC成骨分化的研究

发布时间:2021-01-28 03:13
  背景:骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)作为组织工程骨最理想的种子细胞已无争议。在骨损伤的修复中,有多种细胞因子参与,如属于转化生长因子(TGF-β)超家族的骨形态发生蛋白2(BMP-2)是目前诱导成骨作用最确切的成员;另外,碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是一种广谱的有丝分裂源,能够促进软骨及骨组织的形成,还可直接刺激血管形成以提高植入体内的组织工程骨的新骨形成,它还可与BMP-2共同诱导骨的发生,在骨愈合过程中也发挥重要作用。越来越多的研究发现BMP-2与bFGF联合诱导BMSC比单独应用BMP2或bFGF成骨活性更强。但外源性成骨诱导因子在直接植入体内时易被蛋白酶分解而失去活性、易被冲散流失和稀释,持续作用时间短、效价低,不能针对局部持续发挥刺激和成骨诱导作用。因此,选择基因治疗的方法,通过转基因诱导成骨可很好地克服直接应用外源性生长因子的不足,可增加生长因子的作用时间。腺病毒是目前应用最广的能高效将目的基因导入细胞的媒介之一,它是一种非致病性复制缺陷型载体,能提供长期的基因表达能力且免疫源性非常低,其宿主范围广,... 

【文章来源】:广州医科大学广东省

【文章页数】:49 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

重组腺病毒介导BMP-2/bFGF体外诱导山羊BMSC成骨分化的研究


2A序列连接A、B基因示意图

光带,琼脂糖电泳


PCR扩增BMP-2琼脂糖电泳结果,显示出约1200bp的光带

琼脂糖电泳,光带


PCR扩增bFGF琼脂糖电泳结果,显示出约860bp的光带

【参考文献】:
期刊论文
[1]骨形态发生蛋白-2基因的克隆及重组真核表达质粒的构建[J]. 王卫东,殷力,王刚.  中华显微外科杂志. 2010 (03)
[2]慢病毒介导的增强型绿色荧光蛋白报告基因对间充质干细胞的标记[J]. 李丹,朱康顺,周斌,王劲,颜荣华,李征然,孟晓春,黄明声,姜在波,单鸿.  中华医学杂志. 2010 (19)
[3]骨形态发生蛋白2、血管内皮生长因子165双基因转染小鼠骨髄基质干细胞的体内诱导成骨[J]. 孙立,田晓滨,杨述华,胡如印,汪雷,陆延盛,张宇坤,傅德皓.  中国组织工程研究与临床康复. 2008(47)
[4]Preparation of recombinant human bone morphogenetic protein-2 loaded dextran-based microspheres and their characteristics[J]. Fa-ming CHEN~(2,3) Zhi-fen WU~3 Qin-tao WANG~3 Hong WU~4 Yong-jie ZHANG~2 Xin NIE~2 Yan JIN~(2,5)2 Center for Tissue Engineering,College of Stomatology;3 Department of Periodontology and Mucosal Diseases,College of Stomatology;4 Department of Chemistry,Faculty of Preclinical Medicine,the Fourth Military Medical University,Xi-an 710032,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2005(09)
[5]BMP-2重组腺病毒转染肌源细胞体内外成骨的实验研究[J]. 韩剑锋,林欣,王立春,刘建宇.  中华显微外科杂志. 2005(01)



本文编号:3004254

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