结核分枝杆菌对RAW264.7细胞和THP-1细胞凋亡及细胞因子转录水平的影响

发布时间：2017-04-18 10:03

  本文关键词：结核分枝杆菌对RAW264.7细胞和THP-1细胞凋亡及细胞因子转录水平的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：肺结核是第一个世界卫生组织发布的可致死全球性疾病。据统计,全球每年有800万例新发病例,并有高达两百万的死亡病例。近些年来由于部分耐药结核分枝杆菌株的出现和人类免疫缺陷病疫情扩大,使结核病的防治面临新型重大威胁。因此,为更好的诊断、预防和治疗结核病,我们需要加强结核病基础研究和应用研究。为探讨结核分枝杆菌感染巨噬细胞后不同时间点细胞凋亡情况与其分泌的几种主要细胞因子转录与表达之间的关系,建立THP-1细胞和RAW264.7细胞体外巨噬细胞模型。分别用结核分枝杆菌强毒株H37Rv、疫苗株BCG和从鹿源分离的牛型结核分枝杆菌中等毒力菌株M-8感染细胞,应用流式细胞术检测巨噬细胞在六个时间点的凋亡情况,应用Griess法检测巨噬细胞在六个时间点NO分泌情况,应用cck-8法检测感染后细胞增殖情况,应用荧光定量PCR检测细胞因子TNF-α、IL-10、IL-6的转录水平,应用ELISA方法检测细胞上清液中三种细胞因子的分泌量。结果显示:各感染组细胞凋亡情况、NO分泌量和细胞增殖情况与对照组相比均差异显著(P0.05)。两种细胞各感染组NO分泌量均呈上升趋势,细胞凋亡情况和细胞增值情况变化比较复杂。各时间点细胞因子转录情况和分泌量趋势基本相同。RAW264.7细胞凋亡情况和细胞因子分泌情况变化并未见明显规律。对THP-1细胞,可看出BCG感染组凋亡情况随时间变化呈上升趋势,其分泌的细胞因子TNF-α表现为相同趋势,IL-6表现为相反趋势。H37Rv感染组细胞凋亡情况低于BCG感染组,细胞因子分泌情况一般表现为先增强后抑制。通过对两种巨噬细胞凋亡结果分析表明,THP-1细胞更适合用于结核分枝杆菌免疫机制实验。结核分枝杆菌对巨噬细胞凋亡的机制是一个复杂的过程,但与感染后细胞因子分泌情况密不可分。感染后12 h-24 h时间段往往是结核分枝杆菌发挥逃逸作用的关键时期。本试验通过对结核分枝杆菌感染巨噬细胞后不同时间点细胞因子与凋亡情况关系的研究,为结核分枝杆菌对巨噬细胞凋亡机制提供新思路。
【关键词】：结核分枝杆菌 THP-1细胞 RAW264.7细胞 凋亡 细胞因子
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R378.911
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-7
• 前言7-8
• 第一篇 文献综述8-18
• 第一章 结核病概述8-11
• 1.1 病原学8-9
• 1.2 临床症状9
• 1.3 传播途径9
• 1.4 流行情况9-11
• 第二章 巨噬细胞免疫策略11-14
• 2.1 巨噬细胞概述11
• 2.2 巨噬细胞生物学功能11-12
• 2.3 巨噬细胞对结核分枝杆菌免疫策略12-14
• 第三章 结核分支杆菌免疫逃逸14-18
• 3.1 抑制吞噬体-溶酶体的融合14
• 3.2 抵抗活性氮中间体(RNI)和活性氧自由基(ROI)14-15
• 3.3 抑制MHC分子的加工与递呈15-16
• 3.4 不同毒力结核分枝杆菌对巨噬细胞免疫的影响16-18
• 第二篇 研究内容18-42
• 第一章 结核分枝杆菌对RAW264.7 细胞凋亡及细胞因子转录水平的影响18-32
• 1.1 材料18-19
• 1.2 方法19-23
• 1.3 结果23-29
• 1.4 讨论29-31
• 1.5 小结31-32
• 第二章 结核分枝杆菌对THP-1 细胞凋亡及细胞因子转录水平的影响32-42
• 2.1 材料32
• 2.2 方法32-34
• 2.3 结果34-40
• 2.4 讨论40-41
• 2.5 小结41-42
• 结论42-43
• 参考文献43-49
• 作者简介49-50
• 致谢50

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 魏熙胤;牛瑞芳;;流式细胞仪的发展历史及其原理和应用进展[J];现代仪器;2006年04期

  本文关键词：结核分枝杆菌对RAW264.7细胞和THP-1细胞凋亡及细胞因子转录水平的影响，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：314601