人参皂苷Rb1、Rb2及Rg3在核酸疫苗中的免疫佐剂活性研究

发布时间：2017-04-20 05:04

  本文关键词：人参皂苷Rb1、Rb2及Rg3在核酸疫苗中的免疫佐剂活性研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：人参是一种多年生五加科草本植物,其主要活性成分为人参皂苷与人参多糖。自古以来人参就是一味神奇的中药,具有安神、调整血压、提高身体免疫力的功效。近年来,许多研究发现人参皂苷可以调节免疫应答反应,而核酸疫苗的免疫原性又相对不足,因此,本论文研究了人参皂苷Rb1、Rb2及Rg3作为核酸疫苗免疫佐剂的活性。本实验分别以人参皂苷Rb1、Rb2及Rg3作为免疫佐剂与核酸疫苗共同免疫C57BL/6J小鼠,同时以pc DNA3.1及PBS免疫小鼠作为对照组。接种方式为肌肉注射后电穿孔,两次免疫间隔两周,第二次免疫两周后,对小鼠进行眼球取血收集血清,以Western Blot定性地检测PBS、pc DNA3.1、p D-HSP90C、p D-HSP90C/Rb1、p D-HSP90C/Rb2、p D-HSP90C/Rg3各组血清中抗体的特异性;用ELISA方法及与ELISA试剂盒定量地分别检测各组血清的抗体滴度及细胞因子浓度。实验结果表明:与p D-HSP90C组相比,p D-HSP90C/Rb1与p D-HSP90C/Rg3两组均产生了较高的Ig G、Ig G1、Ig G2b抗体滴度及细胞因子IL-2、4,而Rb2在核酸疫苗p D-HSP90C中没有明显的佐剂效应。本论文实验结果表明人参皂苷Rb1、Rg3有效地促进了Th1与Th2型免疫应答,而Rb2无明显作用,为人参皂苷在疫苗佐剂领域的研发奠定了基础。
【关键词】：人参皂苷Rb1、Rb2、Rg3 核酸疫苗 免疫佐剂
【学位授予单位】：东北师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-8
• 中英文缩写8-9
• 第一章 引言9-20
• 1.1 核酸疫苗9-11
• 1.1.1 核酸疫苗的作用机理及免疫方法9-10
• 1.1.2 核酸疫苗与传统疫苗相比的优势10
• 1.1.3 核酸疫苗自身的局限性10-11
• 1.2 疫苗佐剂及其分类11-13
• 1.2.1 佐剂概述11
• 1.2.2 铝盐佐剂11-12
• 1.2.3 脂质体12
• 1.2.4 细胞因子12
• 1.2.5 乳化油12-13
• 1.2.6 细菌的CpGDNA13
• 1.3 新一代的免疫佐剂—人参皂苷13-18
• 1.3.1 人参皂苷的分类13-15
• 1.3.2 人参皂苷对免疫系统的影响15-17
• 1.3.3 人参皂苷的免疫佐剂活性与其结构的关系17-18
• 1.4 白色念珠菌简述18-19
• 1.5 本研究的目的、内容及意义19-20
• 第二章 实验材料与方法20-36
• 2.1 材料20-22
• 2.1.1 实验动物20
• 2.1.2 核酸疫苗20
• 2.1.3 免疫佐剂20
• 2.1.4 试剂和仪器20-22
• 2.2 方法22-36
• 2.2.1 分组和免疫22
• 2.2.2 核酸疫苗pD-HSP90C的制备22-27
• 2.2.3 重组蛋白rP-HSP90C的制备27-30
• 2.2.4 Western Blot检测抗体特异性30-33
• 2.2.5 间接ELISA法检测抗体滴度33-35
• 2.2.6 ELISA试剂盒检测小鼠血清中IL-2 与IL-4 的含量35
• 2.2.7 数据分析35-36
• 第三章 实验结果与分析36-46
• 3.1 核酸疫苗pD-HSP90C的酶切验证36-37
• 3.2 重组蛋白rP-HSP90C的分离纯化结果37
• 3.3 人参皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 作为免疫佐剂时对核酸疫苗pD-HSP90C活性的影响37-46
• 3.3.1 Western Blot分析小鼠抗血清中抗体的特异性38-40
• 3.3.2 人参皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 对免疫小鼠抗血清中特异性抗体IgG与IgG1、IgG2b抗体滴度的影响40-44
• 3.3.3 人参皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 对免疫小鼠抗血清中细胞因子IL-2、IL-4 含量的影响44-46
• 第四章 讨论46-48
• 4.1 人参皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 对Th细胞免疫应答的影响46-47
• 4.1.1 人参皂苷Rb1、Rg3 促进了Th1 型免疫应答46-47
• 4.1.2 人参皂苷Rb1、Rg3 促进了Th2 型免疫应答47
• 4.1.3 人参皂苷Rb2 未见明显的免疫增强作用47
• 4.2 人参皂苷Rb1、Rb2 及Rg3 佐剂活性与其结构的关系47-48
• 结论48-49
• 参考文献49-53
• 致谢53

【参考文献】

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本文编号：317926