CAMR-FT和CAMR-FN在前列腺肿瘤模型小鼠表达模式的分析
发布时间：2021-08-08 00:16
前列腺肿瘤（Prostate tumor）作为一种常见的男性肿瘤疾病,主要发病于老年男性群体。近年来,由于前列腺肿瘤在中国男性群体中发生率和死亡率呈现明显升高的趋势,因而找到相应的靶向标志物用于前列腺肿瘤早期诊断刻不容缓。前列腺作为男性生殖系统中主要的分泌腺,对男性的生殖健康发挥着重要的生理作用。前列腺肿瘤是一种老年易发性疾病,具有潜伏期长、早期症状不明显、发病率高以及缺乏有效的早期诊断标记物等特点,因而不易早期诊断和提前防治。早在上世纪美国、英国等西方国家就已经针对于前列腺相关疾病开展了一系列研究工作,旨在找到相应研究技术解决这一难题。我国早期由于医疗水平有限,对前列腺相关疾病没有高度重视。然而随着我国人口老龄化进程的发展以及前列腺肿瘤致死率的逐渐升高,引起了人们对前列腺相关疾病的高度重视。但该疾病往往早期症状不易察觉,发现时已是肿瘤晚期,因而找出相应蛋白用于早期检测前列腺相关疾病显得尤为重要。近来研究表明前列腺肿瘤的发生与钙相关蛋白之间存在一定的相关性,而钙离子主要是通过细胞膜上的钙通道蛋白进入细胞,从而维持细胞内的钙稳态。钙稳态失衡,如钙内流增多使得胞浆中钙离子的浓度升高,促进肿...
【文章来源】：陕西师范大学陕西省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
图３－３肿瘤小鼠、９８５小鼠和野生型小鼠前列腺组织的ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果??．－
分别提取不同时期ＸＨ９８５－ＪＸ９１前列腺肿瘤模型小鼠、ＸＨ９８５非肿瘤小鼠和??ＷＴ小鼠总ＲＮＡ，用１．５％琼脂糖凝胶电泳进行检测，可以看到：２８Ｓ、１８Ｓ和５Ｓ??共三条亮带，从图３－３可以看到２８Ｓ条带的亮度约为１８Ｓ的两倍。使用微量快速??核酸定量仪对提取的ＲＮＡ进行纯度和浓度进行测定，ＯＤ２６０／２８０的比值位于??１．８－２．０之间。从以上两点推断出提取的ＲＮＡ质量较好，可以用于实时定量ＰＣＲ实??验（论３?）。??１ＢＳＳ??５Ｓ??１２３４５６７８９??图３－３肿瘤小鼠、９８５小鼠和野生型小鼠前列腺组织的ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果??Ｆｉｇ．?３－３?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｔｉｓｓｕｅ?ｉｎ?ｔｕｍｏｒ?ｍｉｃｅ，?９８５?ｍｉｃｅ?ａｎｄ?ｗｉｌｄ?ｔｙｐｅ??ｍｉｃｅ??１号是前列腺肿瘤早期，２号是前列腺肿瘤中期，３号是前列腺肿瘤晚期，４号是９８５青年小鼠??前列腺组织，５号是９８５中年小鼠前列腺组织，６号是９８５老年小鼠前列腺组织，７号是ＷＴ??青年小鼠前列腺组织，８号是ＷＴ中年小鼠前列腺组织，９号是ＷＴ老年小鼠前列腺组织。??Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＲＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｆ?ｍｉｃｅ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔａｇｅｓ．?１?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ?ｔｈｅ??ｅａｒｌｙ?ｓｔａｇｅ?ｏｆ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｔｕｍｏｒｓ
图３－５ｑＰＣＲ溶解曲线??Ｆｉｇ．?３－５?Ｔｈｅ?ｍｅｌｔ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｑＰＣＲ??从图３－５溶解曲线可以看出，利用ＳＹＢＲ进行ｑＰＣＲ检测Ｃ４ＭＡ－／Ｔ在基因水??平上表达量，从图中可以看出只有一个峰，对应一种产物，对应的峰的位置是退??火温度的位置，即发出荧光的片段是我们需要的产物。??将不同等级前列腺肿瘤小鼠和不同年龄非肿瘤小鼠荧光强度值导出，通过与??对照组相比较，推断在不同品系小鼠中的表达情况。??统计目的基因以及内参基因ＧＡＤＰＨ在各个样品中的Ｃｔ值，运用??公式Ｆ＝（ｌ＋Ｅｍ）ａＭ２＿ｅｔＭ１／（ｌ＋Ｅｎ）ｅｔＮ２＿ＱＮ１计算出Ｇ４ＭＡ－／Ｔ在基因水平上的表达情况。??结果如表３－１所呈现：??表３－１是实时荧光定量ＰＣＲ计算结果??Ｔａｂｌｅ３－１?Ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ??不同品系小鼠?ＥＳ?ＭＳ?ＡＳ?９８５?Ｙ?９８５?Ｍ?９８５?０?ＷＴＹ?ＷＴＭ?ＷＴＯ??计算结果?〇．５８?０．８９?０．２８?１．１９?０．０７?０．１４?１．００?０．４７?１．１９??计算结果?１．４９?０．８３?０．３２?１．４９?０．６１?０．５３?１．００?０．７４?１．１８??计算结果?０．９３?１．３９?０．４８?１．２１?０．２４?１．２０?１．００?０．５０?０．６４??注：ＥＳ：?Ｅａｒｌｙ?Ｓｔａｇｅ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer incidence and mortality in China in 2013:an analysis based on urbanization level[J]. Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Siwei Zhang,Hongmei Zeng,Tingting Zuo,Changfa Xia,Zhixun Yang,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2017(01)
[2]沉默Epha2对前列腺癌PC3细胞生物学性状与血管生成拟态的影响[J]. 曹阳,李清. 实用癌症杂志. 2016(04)
[3]Ryanodine受体的功能结构和调节因子[J]. 范娟,杨瑾,周鑫,董治龙,王李阳,MengMeng Xu,牟玉莲,Miyuki Nishi,Williams Issacs,安书成,Hiroshi Takeshima,Jianjie Ma,徐学红. 中国细胞生物学学报. 2015(01)
[4]Identification of metastasis-associated genes in colorectal cancer through an integrated genomic and transcriptomic analysis[J]. Xiaobo Li,Sihua Peng. Chinese Journal of Cancer Research. 2013(06)
[5]《2012中国肿瘤登记年报》发表[J]. 上海医药. 2013(04)
[6]血清前列腺特异性抗原在前列腺癌诊断与临床分期中的应用[J]. 洪钟亮,江明友,毛云峰,徐倩. 全科医学临床与教育. 2011(04)
[7]钙离子信号与细胞凋亡[J]. 郭静,蒲咏梅,张东才. 生物物理学报. 2005(01)
本文编号：3328816
【文章来源】：陕西师范大学陕西省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
图３－３肿瘤小鼠、９８５小鼠和野生型小鼠前列腺组织的ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果??．－
分别提取不同时期ＸＨ９８５－ＪＸ９１前列腺肿瘤模型小鼠、ＸＨ９８５非肿瘤小鼠和??ＷＴ小鼠总ＲＮＡ，用１．５％琼脂糖凝胶电泳进行检测，可以看到：２８Ｓ、１８Ｓ和５Ｓ??共三条亮带，从图３－３可以看到２８Ｓ条带的亮度约为１８Ｓ的两倍。使用微量快速??核酸定量仪对提取的ＲＮＡ进行纯度和浓度进行测定，ＯＤ２６０／２８０的比值位于??１．８－２．０之间。从以上两点推断出提取的ＲＮＡ质量较好，可以用于实时定量ＰＣＲ实??验（论３?）。??１ＢＳＳ??５Ｓ??１２３４５６７８９??图３－３肿瘤小鼠、９８５小鼠和野生型小鼠前列腺组织的ＲＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果??Ｆｉｇ．?３－３?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｔｉｓｓｕｅ?ｉｎ?ｔｕｍｏｒ?ｍｉｃｅ，?９８５?ｍｉｃｅ?ａｎｄ?ｗｉｌｄ?ｔｙｐｅ??ｍｉｃｅ??１号是前列腺肿瘤早期，２号是前列腺肿瘤中期，３号是前列腺肿瘤晚期，４号是９８５青年小鼠??前列腺组织，５号是９８５中年小鼠前列腺组织，６号是９８５老年小鼠前列腺组织，７号是ＷＴ??青年小鼠前列腺组织，８号是ＷＴ中年小鼠前列腺组织，９号是ＷＴ老年小鼠前列腺组织。??Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＲＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｆ?ｍｉｃｅ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔａｇｅｓ．?１?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ?ｔｈｅ??ｅａｒｌｙ?ｓｔａｇｅ?ｏｆ?ｐｒｏｓｔａｔｅ?ｔｕｍｏｒｓ
图３－５ｑＰＣＲ溶解曲线??Ｆｉｇ．?３－５?Ｔｈｅ?ｍｅｌｔ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｑＰＣＲ??从图３－５溶解曲线可以看出，利用ＳＹＢＲ进行ｑＰＣＲ检测Ｃ４ＭＡ－／Ｔ在基因水??平上表达量，从图中可以看出只有一个峰，对应一种产物，对应的峰的位置是退??火温度的位置，即发出荧光的片段是我们需要的产物。??将不同等级前列腺肿瘤小鼠和不同年龄非肿瘤小鼠荧光强度值导出，通过与??对照组相比较，推断在不同品系小鼠中的表达情况。??统计目的基因以及内参基因ＧＡＤＰＨ在各个样品中的Ｃｔ值，运用??公式Ｆ＝（ｌ＋Ｅｍ）ａＭ２＿ｅｔＭ１／（ｌ＋Ｅｎ）ｅｔＮ２＿ＱＮ１计算出Ｇ４ＭＡ－／Ｔ在基因水平上的表达情况。??结果如表３－１所呈现：??表３－１是实时荧光定量ＰＣＲ计算结果??Ｔａｂｌｅ３－１?Ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ??不同品系小鼠?ＥＳ?ＭＳ?ＡＳ?９８５?Ｙ?９８５?Ｍ?９８５?０?ＷＴＹ?ＷＴＭ?ＷＴＯ??计算结果?〇．５８?０．８９?０．２８?１．１９?０．０７?０．１４?１．００?０．４７?１．１９??计算结果?１．４９?０．８３?０．３２?１．４９?０．６１?０．５３?１．００?０．７４?１．１８??计算结果?０．９３?１．３９?０．４８?１．２１?０．２４?１．２０?１．００?０．５０?０．６４??注：ＥＳ：?Ｅａｒｌｙ?Ｓｔａｇｅ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer incidence and mortality in China in 2013:an analysis based on urbanization level[J]. Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Siwei Zhang,Hongmei Zeng,Tingting Zuo,Changfa Xia,Zhixun Yang,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2017(01)
[2]沉默Epha2对前列腺癌PC3细胞生物学性状与血管生成拟态的影响[J]. 曹阳,李清. 实用癌症杂志. 2016(04)
[3]Ryanodine受体的功能结构和调节因子[J]. 范娟,杨瑾,周鑫,董治龙,王李阳,MengMeng Xu,牟玉莲,Miyuki Nishi,Williams Issacs,安书成,Hiroshi Takeshima,Jianjie Ma,徐学红. 中国细胞生物学学报. 2015(01)
[4]Identification of metastasis-associated genes in colorectal cancer through an integrated genomic and transcriptomic analysis[J]. Xiaobo Li,Sihua Peng. Chinese Journal of Cancer Research. 2013(06)
[5]《2012中国肿瘤登记年报》发表[J]. 上海医药. 2013(04)
[6]血清前列腺特异性抗原在前列腺癌诊断与临床分期中的应用[J]. 洪钟亮,江明友,毛云峰,徐倩. 全科医学临床与教育. 2011(04)
[7]钙离子信号与细胞凋亡[J]. 郭静,蒲咏梅,张东才. 生物物理学报. 2005(01)
本文编号：3328816
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