恶性疟原虫合子/动合子表面25蛋白ELISA定量检测方法的建立及其应用

发布时间：2021-08-13 05:10

　　目的建立恶性疟原虫合子/动合子表面25蛋白（25 KDa Plasmodium falciparum sexual stage protein,Pfs25）的ELISA定量检测方法。方法以双抗体夹心ELISA法为基础,建立Pfs25蛋白的ELISA定量检测方法,并对该方法进行重复性和准确性验证。用建立的方法检测不同重组菌株、CHO细胞中,以及经10 L发酵罐培养菌株纯化各阶段样品中Pfs25蛋白的表达量。结果建立的方法线性范围为0¹.6μg/ml,R2=0.984,检测灵敏度为0.032μg/ml,回收率为81%¹19.0%,CV﹤15%。Pfs25-Pet42a/DE3表达后的Pfs25蛋白浓度在2.03⁷.26μg/ml;Pfs25-p GAPZαA/GS115、Pfs25-p PICZαA/GS115和（α-Pfs25）8-p AO815/GS115表达后的Pfs25蛋白浓度分别为113、105和280μg/ml;3株Pfs25/CHO细胞表达的Pfs25蛋白浓度分别为106.11、116.89和155.01μg/... 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2016,29(12)CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 参考品及样品
    1.2 细胞
    1.3 主要试剂及仪器
    1.4 ELISA定量检测方法的建立
    1.5 方法的验证
        1.5.1 重复性
        1.5.2 准确性
            1.5.2. 1 加标回收试验
            1.5.2. 2 回收试验
    1.6 方法的初步应用
        1.6.1 样品的检测
        1.6.2 样品的SDS-PAGE分析
    1.7 统计学分析
2 结果
    2.1 方法的验证
        2.1.1 重复性
        2.1.2 准确性
    2.2 方法的初步应用
        2.2.1 重组菌株中Pfs25蛋白的表达
        2.2.2 Pfs25蛋白纯化步骤的定量分析
3 讨论



本文编号：3339814