人IL-12基因载体的构建及其在T细胞中的表达研究

发布时间：2021-08-20 14:56

　　目的:探究T细胞携载人IL-12基因对T细胞生长和功能的影响。方法:构建表达人IL-12基因的PiggyBac转座子载体,在电转下,将携载IL-12基因的转座子系统导入新鲜分离的淋巴细胞获得持续稳定表达。通过T细胞表型分析及体外功能实验研究初步探讨T细胞携载IL-12基因的可行性。结果:借助电转可将携载有IL-12基因的PiggyBac转座子系统高效导入新鲜分离的淋巴细胞并获得高效稳定表达;IL-12的分泌可促进T细胞增殖,增加CD4阳性细胞百分比;携载IL-12基因的T细胞在肿瘤细胞刺激下可进一步促进IL-12分泌,增强T细胞的杀瘤活性。结论:在电场作用下,Piggybac转座子系统可将人IL-12基因高效载入并整合至T细胞基因组获得持续稳定表达,分泌的功能性IL-12可促进T细胞增殖,增强杀瘤活性。 

【文章来源】：中国免疫学杂志. 2019,35(21)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 IL-12过表达载体的构建
        1.2.2 IL-12与PiggyBac转座子系统连接的克隆形成
        1.2.3 IL-12阳性克隆的鉴定
        1.2.4 人外周血PBMC的分离
        1.2.5 PBMC的电转及T细胞的体外扩增
        1.2.6 IL-12在T细胞中的表达检测
        1.2.7 T细胞表型分析
        1.2.8 T细胞杀伤能力检测
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 IL-12载体的成功构建
    2.2 构建的IL-12可在T细胞中形成具有生物学活性的IL-12蛋白
    2.3 T细胞表型分析
    2.4 IL-12分泌可促进T细胞的杀伤能力
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]2018年国内外免疫学研究重要进展[J]. 刘娟,曹雪涛.  中国免疫学杂志. 2019(01)
[2]实体瘤CART治疗面临的挑战[J]. 丁烁,赵磊,Rojina Shilpakar,魏云巍.  中国免疫学杂志. 2018(04)



本文编号：3353708