铜绿假单胞菌外膜蛋白F及B型鞭毛蛋白与VP22融合DNA疫苗体液免疫效应的研究

发布时间：2017-05-10 15:12

  本文关键词：铜绿假单胞菌外膜蛋白F及B型鞭毛蛋白与VP22融合DNA疫苗体液免疫效应的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:评价I型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 1,HSV-1)间层蛋白VP22能否增强铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)外膜蛋白F(the outer membrane protein F,Opr F)与B型鞭毛蛋白(type B flagellins,Fla B)体液免疫效力,为进一步研究VP22分子与Pa抗原分子融合的DNA疫苗奠定基础。方法:1.提取DNA疫苗p VAX1-Opr F、p VAX1-VP22-Opr F、p VAX1-Opr F-VP22、p VAX1-Fla B、p VAX1-Fla B-VP22、p VAX1-VP22;2.用体内转染试剂介导将疫苗肌肉注射BALB/c小鼠,免疫三次后制备小鼠抗血清;3.通过Western blot检测抗血清与抗原蛋白结合的特异性;4.间接Elisa检测抗血清效价,用方差分析/t检验的统计学方法分析抗血清效价的组间差异。结果:1.Western blot结果显示p VAX1-Opr F、p VAX1-VP22-Opr F、p VAX1-Opr F-VP22免疫组小鼠抗血清均能特异性结合Opr F;p VAX1-Fla B和p VAX1-Fla B-VP22免疫组小鼠抗血清均能特异性结合Fla B。2.间接Elisa结果表明p VAX1-Opr F-VP22组抗体Ig G效价显著高于p VAX1-Opr F和p VAX1-VP22-Opr F组(P0.05),而p VAX1-Opr F组和p VAX1-VP22-Opr F组之间无显著差异(P0.05);p VAX1-Fla B-VP22组抗血清Ig G效价水平显著高于p VAX1-Fla B组(P0.05)。结论:单表达抗原(Opr F与Fla B)的DNA疫苗以及抗原与VP22融合表达的DNA疫苗均能在小鼠体内诱导特异性体液免疫反应;抗原(Opr F与Fla B)与VP22分子N-端融合表达能显著增强DNA疫苗的体液免疫效力。
【关键词】：铜绿假单胞菌 DNA疫苗 外膜蛋白F 鞭毛蛋白 VP22 体液免疫
【学位授予单位】：川北医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392
【目录】：

• 致谢4-5
• 摘要5-7
• 英文摘要7-11
• 前言11-16
• 第一部分 铜绿假单胞菌外膜蛋白F与VP22 融合DNA疫苗体液免疫效应的研究16-29
• 实验材料16-18
• 实验方法18-25
• 实验结果与分析25-29
• 第二部分 铜绿假单胞菌B型鞭毛蛋白与VP22 融合DNA疫苗体液免疫效应的研究29-34
• 实验材料29-30
• 实验方法30-32
• 实验结果与分析32-34
• 讨论34-38
• 结论38-39
• 参考文献39-44
• 综述：DNA疫苗研究现状44-53
• 参考文献50-53
• 附录53-58
• 个人简历58

【参考文献】

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本文编号：355024