大鼠脂肪间充质干细胞改善大鼠自体卵巢移植效果
发布时间：2022-01-07 05:33
目的观察大鼠脂肪间充质干细胞（ADMSCs）对大鼠卵巢自体移植的作用。方法 8周龄SD大鼠分为4组:正常对照组、自体移植组、自体移植+ADMSCs组及去势组,在自体移植后28d,行卵巢组织HE染色卵泡计数,用免疫组化观察血管生成情况,用TUNEL荧光染色技术进行细胞凋亡计数,ELISA测定血清FSH、AMH水平。结果自体移植+ADMSCs组总卵泡数、原始卵泡数均显著高于自体移植组（P<0.05）。自体移植+ADMSCs组细胞凋亡计数显著低于自体移植组（P<0.05）。与自体移植组相比,自体移植+ADMSCs组大鼠血清FSH水平更低,AMH水平更高（P<0.05）。自体移植+ADMSCs组CD31阳性细胞分布与正常对照组更接近。结论在大鼠卵巢自体移植过程中应用ADMSCs可改善大鼠卵巢自体移植效果,提高移植效率。
【文章来源】：生殖医学杂志. 2020,29(02)
【文章页数】：6 页
【图文】：
各组卵巢HE染色
4．卵巢组织HE染色：术后28d，自体移植组、自体移植+ADMSCs组大鼠麻醉后取出移植卵巢组织，正常对照组大鼠取出双侧卵巢组织后，取2mm×1mm×1mm大小，多聚甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，切片厚度3～4μm，每个卵巢组织取第5张切片进行HE染色，卵泡计数。并对卵泡种类及形态进行分类，分类标准如下：原始卵泡：指单层扁平或扁平与立方混合的颗粒细胞包绕卵母细胞；细胞；次级卵泡：指两层或以上立方型颗粒细胞包绕卵母细胞；窦状卵泡指两层以上的颗粒细胞，卵泡内有窦腔形成；形态正常的卵泡：圆形或椭圆形卵泡形态，颗粒细胞分布均匀，卵母细胞或颗粒细胞未见浓缩核；形态异常的卵泡：卵泡失去圆形或椭圆形结构，卵母细胞形态不规则，核固缩，颗粒细胞排列紊乱、缺失明显或出现核固缩。为了避免重复计数，只有卵母细胞核可见的卵泡被计数在内。5.TUNEL荧光染色评价细胞凋亡率：卵巢移植后28d，应用TUNEL荧光染色技术，根据试剂盒（Roche，瑞士）说明书，计算石蜡包埋切片中的DNA损伤率。取各卵巢组织，连续切片，取第4张切片行TUNEL荧光染色，按照试剂盒说明进行检测。荧光显微镜下正常细胞核呈蓝色，凋亡细胞核呈绿色。利用Image Por-plus 6.0图像分析软件计算阳性细胞百分比，即凋亡指数（AI）。
ADMSCs鉴定
【参考文献】：
期刊论文
[1]Immunomodulatory effects of mesenchymal stem cells derived from adipose tissues in a rat orthotopic liver transplantation model[J]. Chi-Dan Wan, Rui Cheng, Hong-Bo Wang and Tao LiuDepartment of General Surgery, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2008(01)
本文编号：3573916
【文章来源】：生殖医学杂志. 2020,29(02)
【文章页数】：6 页
【图文】：
各组卵巢HE染色
4．卵巢组织HE染色：术后28d，自体移植组、自体移植+ADMSCs组大鼠麻醉后取出移植卵巢组织，正常对照组大鼠取出双侧卵巢组织后，取2mm×1mm×1mm大小，多聚甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，切片厚度3～4μm，每个卵巢组织取第5张切片进行HE染色，卵泡计数。并对卵泡种类及形态进行分类，分类标准如下：原始卵泡：指单层扁平或扁平与立方混合的颗粒细胞包绕卵母细胞；细胞；次级卵泡：指两层或以上立方型颗粒细胞包绕卵母细胞；窦状卵泡指两层以上的颗粒细胞，卵泡内有窦腔形成；形态正常的卵泡：圆形或椭圆形卵泡形态，颗粒细胞分布均匀，卵母细胞或颗粒细胞未见浓缩核；形态异常的卵泡：卵泡失去圆形或椭圆形结构，卵母细胞形态不规则，核固缩，颗粒细胞排列紊乱、缺失明显或出现核固缩。为了避免重复计数，只有卵母细胞核可见的卵泡被计数在内。5.TUNEL荧光染色评价细胞凋亡率：卵巢移植后28d，应用TUNEL荧光染色技术，根据试剂盒（Roche，瑞士）说明书，计算石蜡包埋切片中的DNA损伤率。取各卵巢组织，连续切片，取第4张切片行TUNEL荧光染色，按照试剂盒说明进行检测。荧光显微镜下正常细胞核呈蓝色，凋亡细胞核呈绿色。利用Image Por-plus 6.0图像分析软件计算阳性细胞百分比，即凋亡指数（AI）。
ADMSCs鉴定
【参考文献】：
期刊论文
[1]Immunomodulatory effects of mesenchymal stem cells derived from adipose tissues in a rat orthotopic liver transplantation model[J]. Chi-Dan Wan, Rui Cheng, Hong-Bo Wang and Tao LiuDepartment of General Surgery, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2008(01)
本文编号：3573916
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