抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体工程细胞的驯化、抗体表达及鉴定

发布时间：2022-02-12 16:26

　　目的:通过对稳定表达抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体的CHO细胞进行驯化,检测其抗体的表达情况,并对所表达抗体的生物学活性进行初步鉴定。方法:将本课题组前期筛选得到的稳定高表达细胞株1-D9进行无血清驯化,使其适合悬浮培养后接种到摇瓶,通过调整不同的培养条件,每天检测细胞的活率和抗体表达量,并对表达的抗体进行生物学活性鉴定。结果:通过驯化得到了适合悬浮培养的CHO细胞株,其抗体表达量高,生产周期短;并优化了其悬浮培养条件,表达的抗体经鉴定其生物学活性稳定。结论:优化了抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体表达条件,为下一步工业化生产提供了实验依据。 

【文章来源】：生物技术通讯. 2016,27(06)

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 贴壁细胞无血清驯化
    1.3 摇瓶培养
    1.4 悬浮细胞的传代稳定性和冻存稳定性检测
    1.5 嵌合抗体的纯化及鉴定
    1.6 嵌合抗体的体外中和活性测定
2 结果
    2.1 贴壁细胞无血清驯化
    2.2 无血清培养基的筛选
    2.3 嵌合抗体表达量的测定
    2.4 悬浮适应细胞的传代和冻存稳定性检测
    2.5 嵌合抗体的纯化
    2.6 SDS-PAGE和Western印迹检测
    2.7 嵌合抗体的体外中和活性测定
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]CHO细胞无血清培养基的工艺优化[J]. 蒋娟娟,任东升,段鑫,张艳.  天然产物研究与开发. 2016(04)



本文编号：3622049