小鼠屎肠球菌血流感染的血清多肽质谱分析

发布时间：2022-08-08 14:58

　　目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）分析屎肠球菌血流感染后不同时间点小鼠的血清多肽指纹图谱,筛选差异多肽峰,建立相应的诊断模型并寻找新的标志物。方法 90只ICR小鼠分为对照组（10只）与感染组（80只）。其中,对照组注射无菌磷酸缓冲盐溶液（PBS）,感染组注射1/2 LD50的菌液,注射量均为0.1 ml/10 g,分别于8个时间点（感染后1、3、6、12、24、48、96、128 h）收集血液标本检测白细胞介素（IL）-1α、IL-1β和IL-6水平。收集血清标本,经弱阳离子磁珠纯化后,行MALDI-TOF MS检测,并采用BioExplorer软件分析屎肠球菌感染组与对照组的血清多肽指纹图谱。应用纳米液相色谱-电喷雾电离-串联质谱对候选多肽氨基酸序列进行鉴定。结果与对照组相比,感染组小鼠精神萎靡,活动减少;其血液中IL-1α含量呈下降趋势,IL-1β和IL-6呈上升趋势。分析多肽指纹图谱,共检测到102个血清多肽峰,以感染组与对照组含量相差5倍为基准筛选出了8个感染组高于对照组的多肽（P<0.01）,9个感染组低于对照组的多肽（P<0.0... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株来源及实验动物
        1.1.2 仪器及试剂
    1.2 方法
        1.2.1 屎肠球菌半数致死量(median lethal dose,L D5 0)测定
        1.2.2 血流感染小鼠模型的建立
        1.2.3 血清多肽提取
        1.2.4 MALDI-TOF MS分析及数据处理
        1.2.5 候选多肽质谱鉴定
        1.2.6 IL-1α、IL-1β和IL-6浓度测定
    1.3统计学处理
2 结果
    2.1 小鼠感染后体征
    2.2 各组小鼠IL-1α、IL-1β和IL-6检测结果
    2.3 血清多肽质谱图检测及差异多肽分析
        2.3.1 感染组与对照组样本血清多肽质谱图的检测
        2.3.2 两组样本的差异多肽分析
        2.3.3 多肽指纹图谱诊断模型的建立
        2.3.4 候选多肽的鉴定
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3671722