HCMV对树鼩原代肺细胞感染性及病毒肺部感染致病的初步研究

发布时间：2022-10-10 11:50

　　人巨细胞病毒（Human cytomegalovirus,HCMV）是已知最大的DNA双链疱疹病毒,在全球范围内广泛流行,是人类先天性疾病的主要病毒原因之一,作为一种感染性强、严重致病的病原体,准确的诊断和有效的预防是关键。目前HCMV研究的困境是无有效诊断方式,无有效的抗病毒药物和疫苗投入使用,严格的种属特异性也阻碍了动物模型的研究。现有动物模型几乎都为异种巨细胞病毒异种模型,不能代表HCMV的感染与致病特点。树鼩作为新型实验动物,遗传、解剖与生理特性等多方面近似于人类,具有体型小、易繁殖、易操作等优点,有望作为人类巨细胞病毒的新型感染模型。首先,本研究获取并培养树鼩原代肺细胞,接种HCMV,得到其可受病毒感染引发病变和致死,并依据病变特性和相关肺炎模型报道,确定了活体树鼩接种病毒的剂量;其次,通过病毒液滴鼻感染活体树鼩,各临床体征和生化指标检测发现,体温、体重、血常规和生化指标与正常健康的树鼩相比,呈现明显异常,尿液和血液检测有病毒核酸阳性,部分树鼩肺部有局灶性出血,为典型巨细胞病毒肺炎临床症状;最后,经过树鼩不同组织核酸、蛋白检测,肺部是HCMV病毒主要感染和潜伏器官,病毒集中于... 

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩写说明表
第一章 绪论
    1.1 人类巨细胞病毒(HCMV)的流行与危害
        1.1.1 HCMV的研究背景
        1.1.2 HCMV的流行现状和危害
        1.1.3 HCMV疾病的治疗现状
    1.2 HCMV检测的标志性蛋白
        1.2.1 HCMV的几种主要蛋白的介绍
        1.2.2 HCMV感染的实验室主要检测蛋白
    1.3 HCMV临床感染的特点与检测方式
        1.3.1 HCMV的主要临床感染特点和检测方式
        1.3.2 HCMV潜伏感染的可能性
    1.4 巨细胞病毒感染的动物模型
        1.4.1 现有的巨细胞病毒感染模型概述
        1.4.2 HCMV的动物感染研究现状
        1.4.3 HCMV肺炎模型的研究
    1.5 树鼩的病毒感染模型
        1.5.1 树鼩作为实验动物的研究背景
        1.5.2 树鼩用于人类疾病动物模型的研究现状
        1.5.3 树鼩HCMV感染的肺炎模型
    1.6 研究的目的和意义
    1.7 本研究的技术路线
第二章 树鼩肺细胞的分离培养和HCMV感染的研究
    2.1 引言
    2.2 实验材料和方法
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 主要仪器和设备
        2.2.3 试剂配方
        2.2.4 树鼩原代肺细胞的分离培养和初步鉴定
        2.2.5 HCMV-towne对树鼩和小鼠原代肺细胞的感染性研究
    2.3 实验结果与分析
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第三章 HCMV感染树鼩肺引起肺炎的临床指标检测
    3.1 引言
    3.2 实验材料与方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 主要仪器和设备
        3.2.3 HCMV-towne对树鼩接种方式的研究
    3.3 实验结果与分析
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
第四章 HCMV-towne接种树鼩后肺炎或多器官功能障碍的病毒核酸,蛋白的检测
    4.1 引言
    4.2 实验材料和方法
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 主要仪器和设备
        4.2.3 试剂配方
        4.2.4 HCMV-towne滴鼻感染树鼩肺后的各组织器官中病毒核酸检测(gb)
        4.2.5 HCMV-towne滴鼻感染树鼩肺后的重要组织器官中病毒蛋白WB检测(IE-1,UL44,gB)
        4.2.6 HCMV-towne感染树鼩肺后肺组织切片的免疫荧光检测(gB蛋白)
        4.2.7 HCMV-towne感染树鼩肺后感染肺原代细胞培养检测(核酸)
        4.2.8 HCMV-towne感染树鼩肺组织匀浆后病毒检测(细胞CPE)
    4.3 实验结果和分析
    4.4 讨论
    4.5 本章小结
第五章 结论
致谢
参考文献
附录A 攻读硕士期间发表论文目录
附录B 作者简介


【参考文献】：
期刊论文
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[3]天麻素对老年痴呆树鼩海马BDNF表达的影响[J]. 何保丽,角建林,李波,李进涛,王丽梅.  昆明医科大学学报. 2013(09)
[4]链脲佐菌素诱导树鼩2型糖尿病[J]. 吴晓云,李昀海,常青,张林强,廖莎莎,梁斌.  动物学研究. 2013(02)
[5]建立人巨细胞病毒小鼠间质性肺炎模型[J]. 侯舒,王亚亭,徐叔云.  中国药理学通报. 2005(05)
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本文编号：3689567