不同预处理方法对MSCs分泌的exosomes免疫调节功能影响的研究

发布时间：2017-05-16 12:15

  本文关键词：不同预处理方法对MSCs分泌的exosomes免疫调节功能影响的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过不同预处理手段干预小鼠骨髓间充质干细胞(MSC)在体外的培养微环境,研究微环境改变对MSC分泌的exosome在体内外免疫调节作用的影响,以此来优化MSC来源的exosome,使其具备更佳的免疫调节能力。方法:体外实验部分:首先对MSC的体外培养环境分别进行如下预处理:A组(正常培养组),B组(低氧预处理组),C组(IFN-γ预处理组),D组(IFN-γ+TNF-α联合预处理组),收集上清中的exosome,比较不同预处理组exosome分泌量的差异;利用CM-Di I标记MSC分泌的exosome,观察脾淋巴细胞摄取exosome的过程;在此基础上通过体外MSC-exosome与脾淋巴细胞共培养实验研究其对T淋巴细胞增殖,分化,相关细胞因子分泌的作用。体内实验部分:建立小鼠脚掌炎症模型,分别注射不同预处理组来源的exosome,观察MSC分泌的exosome对体内迟发型超敏反应的影响。结果:低氧预处理组、IFN-γ预处理组以及IFN-γ+TNF-α联合预处理组MSC分泌的exosome量均高于正常培养组(P0.05),并且低氧预处理组exosome的分泌量高于其他两个预处理组,差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,正常培养组及各预处理组MSC分泌的exosome均能明显抑制CD4+T淋巴细胞的增殖(P0.01),但将各exosome处理组对T淋巴细胞的增殖抑制率两两比较,差异无统计学意义(P0.05);与对照组相比,各exosome处理组均能上调FOXP3的表达水平,增加Treg细胞的比例(P0.05),其中IFN-γ预处理组以及IFN-γ+TNF-α联合预处理组来源的exosome诱导CD4+T淋巴细胞向调节性T细胞分化的作用较其它两组更明显,差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,各exosome处理组均能促进T淋巴细胞分泌更多的IL-4,IL-10(P0.05),其中IFN-γ预处理组的作用最显著(P0.01)。小鼠脚掌炎症在体实验中:与对照组小鼠相比,各exosome处理组小鼠右后脚掌的肿胀程度明显减轻(P0.05),但各exosome处理组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:MSC在低氧或炎症细胞因子的刺激下,exosome的分泌量均增加,尤其是低氧刺激后,exosome的分泌量显著增加。不同预处理来源的MSC-exosome均能有效抑制T淋巴细胞的增殖。炎性细胞因子预处理来源的MSC-exosome可明显促进Treg细胞的分化,具备更好的免疫调节能力。
【关键词】：骨髓间充质干细胞 预处理 Exosome 免疫调节
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-23
• 结果23-38
• 讨论38-46
• 结论46-47
• 参考文献47-51
• 综述51-59
• 参考文献55-59
• 英汉双解缩略词表59-60
• 攻读学位期间发表的论文60-61
• 致谢61-63

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本文编号：370810