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Rictor/mTORC2调节小鼠睾丸血睾屏障与精子发生

发布时间:2022-12-09 06:39
  目的研究Rictor/m TORC2在睾丸血睾屏障形成、睾丸发育和精子发生中的作用及相关机制。方法采用Cre-lox P重组酶系统,构建睾丸支持细胞中rictor基因敲除小鼠。比较敲除鼠和对照鼠的生殖器官外观和质量。HE染色观察睾丸和附睾的组织形态。采用流式细胞技术检测生精小管的细胞周期。采用免疫荧光技术检测增殖蛋白(Ki-67)和分离酶蛋白的表达。采用免疫组化和Western blot技术检测血睾屏障相关蛋白表达。结果相比对照鼠,敲除鼠的睾丸和附睾体积和重量都明显变小(P<0.01);敲除鼠的生精细胞中二倍体细胞显著上升(P<0.01),单倍体细胞显著下降(P<0.01),而四倍体细胞、Ki-67和分离酶蛋白无显著差异;血睾屏障相关蛋白出现严重的位置错乱,而蛋白表达量不受影响。结论睾丸支持细胞中rictor基因的正常表达,在血睾屏障结构完整性维持和功能发挥以及精子正常发生中起着至关重要作用。 

【文章页数】:8 页

【文章目录】:
1 材料和方法
    1.1 实验动物及其繁殖
    1.2 实验动物基因型鉴定
    1.3 免疫组化/免疫荧光/苏木素-伊红染色 (IHC/IF/HE)
    1.4 蛋白免疫印迹 (Western blot)
    1.5 细胞周期检测
    1.6 统计学处理与分析
2 结果
    2.1 rictor敲除鼠的敲除效果鉴定
    2.2 rictor敲除鼠的表型变化
    2.3 rictor敲除鼠的细胞周期检测结果
    2.4 rictor敲除鼠的生精小管BTB变化
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]睾丸支持细胞连接结构在精子发生过程的作用[J]. 黄瑞,朱伟杰.  生殖与避孕. 2013(03)



本文编号:3715036

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