柯萨奇病毒A组16型实验性减毒活疫苗关键工艺研究

发布时间：2024-06-12 02:05

　　手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种由多种肠道病毒引起的急性传染病,主要感染5岁以下婴幼儿,临床表现为手、足、口等部位发生皮疹、疱疹,严重时可导致脑干脑炎、无菌性脑膜炎、肺水肿甚至死亡。肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒 A 组 16 型(Coxsackievirus A16,CA16)为引起手足口病的两种主要病原体。以往的报道显示,手足口病的严重病例主要由EV71引起,但越来越多的流行病学调查表明,CA16引起的症状不再是温和的,也可引起严重的神经系统并发症,甚至导致死亡。目前CA16疫苗的研究还没有取得突破性进展,尚无进入临床试验阶段的报导,并且EV71疫苗对CA16感染也没有保护作用。因此,CA16疫苗对手足口病的全面防控具有重要的意义。减毒活疫苗的研究是CA16疫苗研究的一个方向,而冻干剂型的是又是研究的重点。因此,本论文主要针对CA16减毒活疫苗生产的抽提纯化工艺、冻干工艺等关键工艺进行深入研究,并对抽提纯化工艺和冻干工艺进行系统评价,为今后冻干CA16减毒性疫苗的研发奠定基础。氯仿抽提纯化工艺结...

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１病毒液与氯仿不同体积比ＰＢＳ洗涤上清样品病毒感染性滴度??１：?ＣＡ１６病毒原液；２：氯仿抽提后上清液；３：?ＰＢＳ洗涤第１次后上清液；４：?ＰＢＳ洗涤第２次后??

涤次数的增多，其病毒含量逐渐降低，但在洗涤第５次时上清样中病毒感染性滴度仍??为４．２５?ｌｇＣＣＩＤ５〇／ｍｌ?￣４．７５?ＩｇＣＣ丨Ｄ５０／ｍｌ，一抽五洗后混合液中的病毒感染性滴度为??７．１２５?ＩｇＣＣｌＤＷｍ卜７．７５?ＩｇＣＣＩＤＷｍｌ?（如图１所示）。病毒液与氯仿按....

图３氯仿一抽多洗样品中蛋白含量的测定结果??１：氯仿抽提后上清；２：?：?ＰＢＳ洗涤第１次后上清液；３：?ＰＢＳ洗涤第２次后上清液；４：?ＰＢＳ洗??

行一抽多洗后混合液中蛋白含量的检测。蛋白含量结果显示，氯仿抽提可以大大降??低残余蛋白含量，ＰＢＳ洗涤第２次的上清液中蛋白含量极低为５１．１３?ｙｇ／ｍ丨？６８．９８?ｕ??ｇ／ｍｌ?（如图３所示）；而病毒液与氯仿三个不同体积比对蛋白去除率没有明显影响，??２４??

图6不同组分含明胶保护剂冻干产品图

■冻干前病毒感染性滴虔?■冻干后病毒感染性滴虔??Ｅｔｔｌ?Ｕ?ｆ?ｔ??ＩＥ：?ｊ??Ｉ：：?■■■■■■＿．??ｉ?ｎ?ｉｎ?ｉｖ?ｖ?ｖｉ?ｖｎ??图５不同组分含明胶保护剂冻干样品滴度降结果??Ｆｉｇ．５．?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｍｐｏｎｅｎ....

图9不同组分无明胶保护剂冻干产品图

■冻干前病毒感染性滴度?■冻干后病毒感染性滴度??〇?２．７５??Ｅ?９．００「｜?Ｉ?３?１３?”Ｓ?１３８??Ｉ８＇００?ｒ－ｎ?＾３?Ｐｎ?２〇〇??麵?ｌｉｒｎｍ??ＡＢＣＤＥＦＧＨ??图８不同组分无明胶保护剂冻干后样品的滴度降结果??Ｆｉｇ．８．?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ....

本文编号：3993058