基因芯片技术分析骨髓间充质干细胞神经分化中Wnt信号通路的激活
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【摘要】:背景:通过对骨髓间充质干细胞诱导向神经元样分化的Wnt信号调控机制进行研究,为骨髓间充质干细胞在脊髓损伤及组织工程中的应用打下基础。目的:应用基因芯片技术测试人骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化过程中相关基因的表达变化。方法:分离和纯化人骨髓间充质干细胞,选取第5代细胞,基于Gateway~(TM)载体构建技术构建慢病毒载体,将Wnt-1转导至人骨髓间充质干细胞。设置3个实验组,分别为对照组、未转导组以及转导组,诱导人骨髓间充质干细胞神经分化,扫描电镜下观察细胞形态,应用基因芯片检测Wnt信号通路基因的调控变化及差异表达。结果与结论:(1)扫描电镜下发现:转导Wnt-1并诱导分化的细胞具有神经元样细胞的形态。(2)基因芯片杂交技术检测发现:3 287个基因上调,4 215个基因下调,与神经系统发育和分化相关基因有上调和下调的变化。(3)从中挑选了相关基因验证,表明转导Wnt-1后细胞内Wnt通路激活,下游基因转录,促进人骨髓间充质干细胞的神经分化。
【作者单位】: 广东医学院附属医院骨科;
【关键词】: 骨髓 间质干细胞 细胞分化 神经元 芯片分析技术 组织工程 干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 转导 神经分化 电镜 Wnt信号通路 基因芯片
【基金】:湛江市科技计划项目基金(2013B01095),课题名称:骨髓间充质干细胞转导Wnt-1基因向神经细胞分化前后基因表达的对比研究 广东医学院青年基金(XQ1334),课题名称:Wnt信号通路对骨髓间充质干细胞增殖调控的研究~~
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction基因在骨髓间充质干细胞分化过程中均有表达,并证实骨髓间充质干细胞可自我复制、增殖、有多向分化该信号通路在促进人骨髓间充质干细胞增殖和分化等潜能,属多能干细胞[1-8]。在体内外培养条件下,骨髓间生物学功能中起着重要作用。充质干细胞可向成骨细胞、
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