人源化抗血管内皮生长因子单克隆抗体质控方法的建立

发布时间：2017-07-08 13:28

  本文关键词：人源化抗血管内皮生长因子单克隆抗体质控方法的建立

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【摘要】：目的建立人源化抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)单克隆抗体的质控方法。方法采用还原/非还原型毛细管凝胶电泳(CE-SDS)测定人源化抗VEGF单抗的纯度;在0.5和25.0 mg·m L~(-1)浓度条件下,采用分子排阻高效液相色谱(SE-HPLC)测定制品中单体和聚合物含量;毛细管等电聚焦电泳(c IEF)测定其等电点;阳离子交换高效色谱(CEXHPLC)测定电荷异构体含量;反相高效色谱(RP-HPLC)和LC-MS检测Lys-C酶切后制品肽图;人血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,Hu VEC)增殖抑制试验测定其生物学活性;其余项目按照2015年版《中国药典》要求进行。结果人源化抗VEGF单抗原液和成品的还原型CE-SDS的纯度分别(97.77±0.25)%和(97.43±0.57)%,非还原型CE-SDS纯度分别为(98.97±0.15)%和(98.73±0.06)%;0.5 mg·m L~(-1)浓度下,原液和成品的单体含量分别为(98.07±0.55)%和(98.20±0.52)%;25.0 mg·m L~(-1)浓度下,原液和成品的聚合物含量分别为(2.00±0.53)%和(1.93±0.55)%;CEX-HPLC检测原液和成品的酸性区含量分别为(18.33±0.64)%和(18.60±0.44)%,主峰含量分别为(69.03±0.80)%和(69.20±0.44)%,碱性区含量分别为(12.70±1.37)%和(12.20±0.87)%;c IEF和LC-MS测定原液和成品的等电点和肽图均与参比品一致;HUVEC增殖抑制法测定原液和成品的生物学活性分别为参比品的(107±6)%和(100±10)%。其他各项指标均符合《中国药典》要求及其他相关要求。结论初步建立了人源化抗VEGF单克隆抗体的质控方法,可用于该制品的常规质量控制。
【作者单位】： 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室;
【关键词】： 人血管内皮生长因子 人源化抗体 质量控制
【基金】：国家科技重大专项重大新药创制资助项目(2014ZX09304311-001)
【分类号】：R392-33
【正文快照】：

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6 WinterG,李明;人源化抗体[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1994年02期

7 林芸,阎锡蕴;人源化抗体研究历程及发展趋势[J];生物工程学报;2004年01期

8 陶磊;饶春明;王兰;韩春梅;李响;高凯;王军志;;人源化抗表皮生长因子受体单克隆抗体质控方法的建立[J];中国生物制品学杂志;2013年01期

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4 陶磊;饶春明;王兰;韩春梅;李响;高凯;王军志;;人源化抗表皮生长因子受体抗体质控方法和质量标准研究[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年

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本文编号：534804